[發明專利]一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置和使用方法

有效

• 申請號: 201710117733.7
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN106834087B
• 公開（公告）日: 2019-02-22
• 發明（設計）人: 王強;嚴重玲;陳敬艷;李軍偉;顏文飛
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N1/14
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

1.一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置，其特征在于設有培養箱蓋、培養箱、培養基質、同位素添加空間、菌絲室、排水箱蓋、排水箱、過濾泵、植物生長室、噴嘴調控鉤和尼龍網；所述培養箱蓋蓋在培養箱上，培養箱由縱向網分割成菌絲室和植物生長室，培養基質和同位素添加空間放置在菌絲室內，培養箱的底部設有排水孔；排水箱設在培養箱底部，排水箱蓋蓋在排水箱上，過濾泵設在排水箱內，噴嘴調控鉤和尼龍網設在植物生長室內，噴嘴調控鉤上設有霧化噴嘴，所述霧化噴嘴與過濾泵之間由軟管連接，植物生長室的頂部設植物固定裝置。

2.如權利要求1所述一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置，其特征在于所述培養基質采用陶粒或玻璃珠，所述陶粒的直徑為5mm，玻璃珠的直徑為2mm。

3.如權利要求1所述一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置，其特征在于所述植物固定裝置采用固定管，所述固定管采用針管或PVC管。

4.如權利要求1所述一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置，其特征在于所述過濾泵上設定時器。

5.如權利要求1所述一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置，其特征在于所述過濾泵采用小型微過濾泵，所述小型微過濾泵采用HJ-1500型小型微過濾泵，25W，1500L/h，流量可調節。

6.如權利要求1所述一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置，其特征在于所述尼龍網采用不同孔徑的尼龍網，所述尼龍網設上層尼龍網和下層尼龍網，上層尼龍網的孔徑為1mm，下層尼龍網的孔徑為30μm，上層尼龍網設在植物生長室高度12cm處，下層尼龍網設在植物生長室高度6cm處；所述排水孔上覆蓋尼龍網。

7.如權利要求1所述一種定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置，其特征在于所述植物生長室的尺寸為20cm×20cm×20cm。

8.如權利要求1所述定時循環的AM真菌擴繁及功能實驗裝置的使用方法，其特征在于所述使用方法如下：

1)基本材料準備

A植物材料：所述植物材料選自宿主植物、白三葉、長夜車前草、紅樹秋茄中的一種；

B培養基質

按體積比，植物種子使用10％H₂O₂滅菌5min，然后用無菌蒸餾水沖洗干凈，培養在28℃的恒溫箱中預發芽；兩格組合塑料箱、苗缽采用84消毒液和70％酒精滅菌；

2)培養系統的建立

5天后，預發芽的種子移栽至已滅菌的苗缽，苗缽中先添加600g沙土和沸石，按質量比，沙土︰沸石為3︰1，滅菌混合物，滅菌條件為121℃，30min，然后鋪一層菌根接種劑，按質量比，接種劑量為生長基質總量的5％～10％，接著添加200g滅菌基質，每天澆灌無菌水，每3天澆一次1/4改良Hoagland營養液，植物在能夠控制光照和溫度的溫室中進行培養；培養4周后，取出植物幼苗，用無菌水沖洗干凈，隨機選取植物根系采用曲利苯藍染色-方格交叉法測定根系侵染率，之后移栽大小均一的幼苗到植物生長室頂部針管裝置中，用無菌棉固定植物，分室底部排水箱添加4L 1/4改良Hoagland營養液，開啟定時的過濾泵，調節霧化噴嘴為植物提供生長必需營養，整個系統形成定時循環設計；

所述改良Hoagland營養液的配方為：

磷酸二氫鉀136g/L，硝酸鉀101g/L，硝酸鈣236g/L，硫酸鎂246.5g/L，硼酸2.86g/L，氯化錳1.81g/L，硫酸鋅0.22g/L，硫酸銅0.08g/L，錳酸0.02g/L，硫酸亞鐵5.57g/L，乙二胺四乙酸7.45g/L；其中P元素含量要低于20μg/g；

3)培養過程

培養過程在溫室中進行，育苗前期在培養基質表面覆蓋一層黑色塑料薄膜，植物地上部保持在外部，植物幼苗移栽到分室裝置后，根據植物需要調節澆灌時間和營養水平，培養過程中透過視窗隨時觀察較細菌根穿過上層尼龍網伸展到根系微生長空間或區隔室，或觀察菌絲穿過下層尼龍網進入菌絲體生長室，開展根外菌絲功能研究。