[發(fā)明專利]一種可作為基因載體的兩親性多肽分子

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710117069.6
• 申請(qǐng)日: 2017-03-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106916209B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹美文;徐海;趙文婧;盧沙;謝子龍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)石油大學(xué)（華東）
• 主分類號(hào): C07K14/00
• 分類號(hào): C07K14/00;C12N15/87
• 代理公司: 青島清泰聯(lián)信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37256
• 代理人: 欒瑜

1.一種可作為基因載體的兩親性多肽分子，其特征在于，所述兩親性多肽分子為：

Ac-Arg-Gly-Asp-Gly-Pro-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Ile-Ile-Ile-Gly-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-NH₂，結(jié)構(gòu)如下：

其中，Arg為精氨酸，Gly為甘氨酸，Asp為天冬氨酸，Pro為脯氨酸，Ala為丙氨酸，Ile為異亮氨酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩親性多肽分子，其特征在于，所述兩親性多肽分子中具有細(xì)胞結(jié)合能力的為Arg-Gly-Asp片段，具有基質(zhì)金屬蛋白酶響應(yīng)性的為Gly-Pro-Leu-Gly-Leu-Ala片段，以及具有與基因分子結(jié)合并將基因分子轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)部的為Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg-Arg片段。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的兩親性多肽分子，其特征在于，所述兩親性多肽分子在pH為7.0的Tris緩沖液中，濃度在0.015-1.0mM之間時(shí)，呈球狀聚集體結(jié)構(gòu)，直徑為5-100nm。

4.一種由權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的可作為基因載體的兩親性多肽分子所制備得到的基因轉(zhuǎn)染試劑。

5.一種由權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的可作為基因載體的兩親性多肽分子在制備基因轉(zhuǎn)染試劑中的應(yīng)用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述兩親性多肽分子在濃度100μM以下對(duì)人體細(xì)胞作用時(shí)間≤6小時(shí)時(shí)不具有毒性。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述人體細(xì)胞選自人胚腎細(xì)胞293E、人肺癌細(xì)胞A549、人宮頸癌細(xì)胞Hela和人肝癌細(xì)胞Hepg2中的至少一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述兩親性多肽分子在與λ-DNA分子混合時(shí)，混合體系在600nm波長(zhǎng)處的熒光強(qiáng)度隨所述兩親性多肽分子所帶正電荷數(shù)量與λ-DNA分子所帶負(fù)電荷數(shù)量的比值的增加而減小，并在比值在3-5之間達(dá)到平衡，使λ-DNA分子由伸展構(gòu)象轉(zhuǎn)變?yōu)槟蹣?gòu)象。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，混合體系達(dá)到平衡時(shí)，λ-DNA分子與所述兩親性多肽分子的復(fù)合物結(jié)構(gòu)呈球狀或棒狀，尺寸為50-200nm。