[發明專利]一種利用植物源煙水促進茶藨子葉狀層菌中甾醇類有效成分積累的方法

有效

• 申請號: 201710116169.7
• 申請日: 2017-03-01
• 公開（公告）號: CN106929464B
• 公開（公告）日: 2018-10-02
• 發明（設計）人: 方磊;周潔;張華
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/14;C12P33/00;C12R1/645
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 賈波

1.一種利用植物源煙水促進茶藨子葉狀層菌中甾醇類有效成分積累的方法，將茶藨子葉狀層菌Phylloporia ribis(Schumach.:Fr.) Ryvarden進行斜面培養，其特征是：斜面培養后，將所得菌絲體接種到液體培養基中進行液體培養，液體培養過程如下：將斜面培養后生長的較好的茶藨子葉狀層菌菌絲團接種到液體培養基中，每1L液體培養基接種7-8個菌絲團，在液體培養第3天向液體培養體系中加入植物源煙水，每1L液體體系中加入0.5-1.5mL植物源煙水，在液體培養第7天再次向液體培養體系中加入植物源煙水，每1L液體體系中加入0.15-0.25mL植物源煙水，液體培養共9-10天；

所述植物源煙水是將6-7kg的植物源燜燒50-60min所產生的煙通入500mL冷水中得到的水溶液，所述植物源是質量比為1:3:3的紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征是：液體培養時，在第一次加入植物源煙水前，在光照強度300-350Lux、27-29℃、140-160rpm的條件下進行培養，在第1次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、140-160rpm的條件下培養12-14h，然后轉至光照強度300-350Lux、27-29℃、140-160rpm的條件下培養，直至第2次加入植物源煙水；在第2次加入植物源煙水后，在黑暗、24-25℃、140-160rpm的條件下培養12-14h，然后轉至光照強度300-350Lux、27-29℃、140-160rpm的條件下培養，直至液體培養結束。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是：所述液體培養基由以下重量百分含量的組分組成：麥芽糖1.5-2.5%，味精0.8-1.2%，KH₂PO₄0.03-0.06%，MgSO₄·7H₂O 0.02-0.04%，葡萄糖0.8-1.2%，酵母膏0.2-0.4%，玉米漿0.05-0.15%，甘露醇1.8-2.5%，CaCO₃ 1.8-2.5%，水余量；PH為6.5-7.0。

4.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是：整個液體培養過程中，保持液體培養體系的pH為6.5-7.0。

5.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是：先將植物源煙水在121℃下進行高壓滅菌20min，然后煮沸30min，放涼后再加入液體培養基中。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征是：植物源煙水的制備方法包括以下具體步驟：將紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干晾干，堆放在黑屋中，用紫外光照射24h，然后用80-90℃的熱氣流處理7-8h；處理后，將紫荊枝干、一球懸鈴木落葉、臭椿枝干葉按照1:3:3的質量比混合，取6-7kg的混合物作為植物源，將6-7kg的植物源燜燒50-60min所產生的煙通入500 ml冷水中，所得的水溶液即為植物源煙水。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征是：所述熱氣流為熱空氣或熱富氧空氣；所得植物源煙水在4℃避光保存備用。

8.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是：斜面培養時，所用培養基由以下重量百分含量的組分組成：土豆20%、瓊脂1.5%、葡萄糖2%、磷酸二氫鉀0.2%、硫酸鎂0.05%、維生素1×10^-3%，水余量；PH為6.5。

9.根據權利要求1所述的方法，其特征是：斜面培養時，培養條件是：在29℃培養5-7天。

10.根據權利要求1或2所述的方法，其特征是：所述茶藨子葉狀層菌以野生狀態下忍冬植株上生長的茶藨子葉狀層菌Phylloporia ribis (Schumach.:Fr.) Ryvarden子實體為菌種，或者以保藏號為CGMCC NO 1195的茶藨子葉狀層菌Phylloporia ribis (Schumach.:Fr.) Ryvarden為菌種。