[發(fā)明專利]一種多花黑麥草粗蛋白含量的測(cè)定方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710115574.7
• 申請(qǐng)日: 2017-03-01
• 公開（公告）號(hào): CN106908408A
• 公開（公告）日: 2017-06-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張新全;楊忠富;黃琳凱;馬嘯;潘玲;汪霞;黃婷;許肖恒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/359
• 分類號(hào): G01N21/359
• 代理公司: 成都點(diǎn)睛專利代理事務(wù)所(普通合伙)51232
• 代理人: 李玉興

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及牧草營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)評(píng)價(jià)領(lǐng)域，具體涉及一種多花黑麥草粗蛋白含量的測(cè)定方法。

背景技術(shù)

多花黑麥草(Lolium multiflorum Lam.)為禾本科黑麥草屬一年生或越年生牧草，適于生長(zhǎng)在氣候溫暖濕潤(rùn)地區(qū)，是具世界栽培意義的優(yōu)良牧草之一，在我國(guó)南方多省(市)均有較大面積的栽培。近年來，隨著國(guó)家農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整，草食畜牧業(yè)快速發(fā)展，多花黑麥草因其產(chǎn)量高、冬春季生長(zhǎng)旺盛、適應(yīng)性強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富等優(yōu)點(diǎn)，解決了我國(guó)南方冬春季家畜飼草不足的問題，在我國(guó)南方地區(qū)糧草輪作中發(fā)揮了極其重要的作用，尤其是草產(chǎn)量高、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)好的優(yōu)良多花黑麥草品種對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)尤為重要。在多花黑麥草育種工作中，不僅要培育產(chǎn)量高的品種，同時(shí)還要兼顧牧草的品質(zhì)。

粗蛋白(Crude Protein，CP)是食品、飼料中含氮化合物的總稱，既包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物，后者又可能包括游離氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸鹽和氨等。牧草中CP的含量是影響牧草營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的重要因素，CP含量高，表明牧草的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，因此研究CP在多花黑麥草中含量的動(dòng)態(tài)變化對(duì)于飼草生產(chǎn)、育種具有重要指導(dǎo)意義。目前國(guó)內(nèi)對(duì)于牧草CP測(cè)定主要以傳統(tǒng)濕化學(xué)方法為主，存在操作復(fù)雜、誤差較大、成本高、耗時(shí)長(zhǎng)、有毒有害化學(xué)藥品污染環(huán)境等突出問題，難以從大量的多花黑麥草品種(系)或樣品中篩選出CP含量高的品種(系)或樣品，因此找出一種能夠快速測(cè)定多花黑麥草中CP含量的方法，對(duì)多花黑麥草育種和牧草品質(zhì)控制具有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種能夠快速測(cè)定多花黑麥草粗蛋白含量的多花黑麥草粗蛋白含量的測(cè)定方法。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：該多花黑麥草粗蛋白含量的測(cè)定方法，包括以下步驟：

A、建立多花黑麥草粗蛋白含量近紅外預(yù)測(cè)模型；所述多花黑麥草粗蛋白含量近紅外預(yù)測(cè)模型采用如下方法建立，具體包括如下步驟：

a、采集多花黑麥草樣品，所述多花黑麥草樣品包括不同品種、不同品系、不同生育期、不同栽培方式和不同部位的鮮草樣品，分別將上述采集的多花黑麥草樣品進(jìn)行預(yù)處理，所述預(yù)處理的方法如下所述：將采集的多花黑麥草樣品先在105℃的環(huán)境中殺青20min，然后在65℃的環(huán)境中烘干后，在微型粉碎機(jī)中粉碎成粉末并過40目篩得到多花黑麥草樣品粉末；

b、將步驟a得到的多花黑麥草樣品粉末分別進(jìn)行近紅外光譜采集得到每個(gè)多花黑麥草樣品粉末的近紅外原始光譜圖；

c、采用PCA算法對(duì)所有多花黑麥草樣品粉末的近紅外原始光譜進(jìn)行分析，剔除具有相似光譜的多花黑麥草樣品，剩余的多花黑麥草樣品為代表性多花黑麥草樣品；

d、采用凱氏定氮法對(duì)步驟c得到的代表性多花黑麥草樣品逐個(gè)進(jìn)行粗蛋白含量進(jìn)行測(cè)定得到每個(gè)代表性多花黑麥草樣品粗蛋白含量值；

e、依據(jù)代表性多花黑麥草樣品粗蛋白含量值將代表性多花黑麥草樣品分為校正集和驗(yàn)證集兩部分，具體方法如下：首先將得到的代表性多花黑麥草粗蛋白含量值從小到大進(jìn)行排序，然后每隔3個(gè)取1個(gè)作為驗(yàn)證集，其余作為校正集，并且調(diào)整代表性多花黑麥草中粗蛋白含量的最小值和最大值，使之劃歸為校正集；