[發明專利]水稻粒長基因GW7的分子標記及其專用引物序列有效
| 申請號: | 201710113391.1 | 申請日: | 2017-02-28 |
| 公開(公告)號: | CN106591489B | 公開(公告)日: | 2021-01-26 |
| 發明(設計)人: | 鄧國富;周維永;黃娟;高利軍;周萌;高菊;戴高興;梁海福;卿冬進;陳仁天;陳韋韋 | 申請(專利權)人: | 廣西作物遺傳改良生物技術重點開放實驗室;廣西壯族自治區農業科學院水稻研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 深圳市科吉華烽知識產權事務所(普通合伙) 44248 | 代理人: | 胡吉科 |
| 地址: | 530007 廣西*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 水稻 基因 gw7 分子 標記 及其 專用 引物 序列 | ||
1.一種水稻粒長基因GW7的分子標記的專用引物序列,其特征在于,所述水稻粒長基因GW7的等位基因的分子標記引物:
GW7DelF:TGACACATATCTCATCATACCATCA;
GW7DelR:AGAGCAGATGCCACAGGAAG;
所述水稻粒長基因GW7的等位基因采用以下步驟進行分子標記:
步驟S1:提取水稻的基因組DNA;
步驟S2:PCR擴增:以步驟S1的水稻基因組DNA為模板,將所述的GW7DelF和GW7DelR引物加入到PCR反應體系中,對所述的水稻基因組DNA進行擴增得到擴增產物;
步驟S3:將PCR擴增產物在質量百分比濃度為1.2%的瓊脂糖凝膠中電泳,溴化乙錠染色,然后在紫外燈下觀察并拍照獲得電泳圖;
步驟S4:根據電泳圖進行分析;
所述水稻粒長基因GW7的等位基因進行電泳圖分析時,如果有擴增條帶,則為含有粒長GW7等位基因;如果沒有擴增條帶,則為不含粒長GW7等位基因;
所述PCR反應體系為22ul的體系:2.0ul的10×Buffer20mM/L的Mg2+,2.0ul的dNTP10mM/L,4umol/L的GW7DelF引物1.0ul,4umol/L的GW7DelR引物1.0ul,0.2ul的Taq酶2U/L,2.0ul的模板DNA40ng/ul,13.8ul的ddH2O;
所述PCR擴增的反應程序為:94℃預變性5min;94℃變性30s、58℃退火30s、72℃延伸45s,循環35次;然后72℃延伸10min后得到擴增產物。
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