[發(fā)明專利]一種香菇醒酒肽及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710110616.8
• 申請(qǐng)日: 2017-02-28
• 公開（公告）號(hào): CN106866787B
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任迪峰;申?duì)N燦;霍春艷;馬琳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K5/103
• 分類號(hào): C07K5/103;C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;A61K38/07;A61P39/02;A61P1/16
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11617
• 代理人: 栗華楠

本發(fā)明屬于食品深加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提取自香菇的醒酒肽及其制備方法與應(yīng)用。所述醒酒肽為Ile?Pro?Leu?His，C端為His，N端為Ile。為了獲取含有上述醒酒肽的產(chǎn)品，本發(fā)明以香菇足為原料，以堿提酸沉法提取香菇足粉中的蛋白，真空冷凍干燥后，將其配制成蛋白液進(jìn)行超高壓作用，再用堿性蛋白酶酶解，酶解液首先經(jīng)過超濾分離，得到不同分子量范圍(0?3KDa、3?5KDa、5?10KDa)的香菇足多肽，繼續(xù)進(jìn)行葡聚糖凝膠層析G?25純化，最后得到純化后醒酒性高的香菇足多肽。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于食品深加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提取自香菇足的醒酒肽及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

酒精性肝病(Alcoholic liver disease，ALD)是一種危及人類健康的疾病，導(dǎo)致其發(fā)生的主要原因是經(jīng)常過量飲酒。近年來，酒精性肝病的發(fā)病率有逐年上升的趨勢(shì)，在一些地區(qū)已成為第一大肝病，引起了世界各國的高度重視。在我國，其發(fā)病率在飲酒者中已高達(dá)6.81％。因此，高效可靠的解酒藥物及其功能性食品已成為當(dāng)今的研究熱點(diǎn)。

肝內(nèi)含有多種催化乙醇的酶系，乙醇進(jìn)入肝臟以后在這些酶的作用下進(jìn)行代謝，一般情況下，進(jìn)入人體內(nèi)的90％的乙醇會(huì)被ADH(乙醇脫氫酶)和ALDH(乙醛脫氫酶)脫氫酶系統(tǒng)催化完成代謝。因此探究脫氫酶系統(tǒng)ADH、ALDH的激活率可更準(zhǔn)確地了解生物活性物質(zhì)對(duì)乙醇處理的能力。

目前市場上的解酒保健品多以中草藥提取物為主，關(guān)于蛋白水解醒酒多肽的報(bào)道多見于玉米肽或花生肽。

申請(qǐng)?zhí)枮?00810219536.7的中國發(fā)明專利申請(qǐng)《玉米醒酒肽飲料及其制備方法》公開了組成為玉米蛋白肽、食用甜味劑、食用酸味劑、其他輔料和水的玉米醒酒肽飲料。

申請(qǐng)?zhí)枮?01510747486.X的中國發(fā)明專利申請(qǐng)《一種花生粕醒酒肽的制備方法》提供一種花生粕醒酒肽的制備方法，步驟包括：以脫脂后的花生粕為原料，經(jīng)浸提和水洗后，除去水溶性蛋白，所得沉淀加水和Amano SD-AY10蛋白酶酶解，滅酶后再加入AlcalaseAF蛋白酶酶解、滅酶、離心、微濾和超濾，制得具有醒酒作用的分子量在1000～3000Da的花生粕多肽。體外試驗(yàn)表明，該多肽溶液對(duì)乙醇脫氫酶具有較高的激活率。

但目前尚未見以香菇足為原料制備的醒酒肽產(chǎn)品。香菇，營養(yǎng)豐富，但香菇足柄纖維化程度高，適口感差，常作副產(chǎn)物丟棄。本發(fā)明將以香菇足為原料，變廢為寶，通過超高壓提取，超濾、凝膠層析純化后香菇足多肽的醒酒活性；探索以酒精損傷人類正常肝細(xì)胞L02為模型，香菇足多肽體外抗氧化活性及其對(duì)酒精損傷人類正常肝細(xì)胞的保護(hù)作用。

發(fā)明內(nèi)容：

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供一種提取自香菇足的醒酒肽，所述醒酒肽為Ile-Pro-Leu-His，C端為His，N端為Ile；

為了獲取上述產(chǎn)品，本發(fā)明以香菇足為原料，以堿提酸沉法提取香菇足粉中的蛋白，真空冷凍干燥后，將其配制成蛋白液進(jìn)行超高壓作用，再用堿性蛋白酶酶解，酶解液首先經(jīng)過超濾分離，得到不同分子量范圍(0-3KDa、3-5KDa、5-10KDa)的香菇足多肽，檢測(cè)它們的ADH、ALDH醒酒酶激活率，得到超濾后酶激活率高的香菇足多肽，繼續(xù)進(jìn)行葡聚糖凝膠層析G-25純化，同樣檢測(cè)它們的ADH、ALDH醒酒酶激活率，得到純化后醒酒性高的香菇足多肽，再采用EASY nano-LC system液相色譜儀，C₁₈(75μm×100mm，3μm)，串聯(lián)LTQ orbitrapvelos pro質(zhì)譜儀，測(cè)定香菇多肽的結(jié)構(gòu)；繼而對(duì)相應(yīng)的多肽進(jìn)行人工合成，檢測(cè)ADH、ALDH酶激活率，從而得到香菇多肽中高醒酒活性的短肽序列。

有益效果：

本發(fā)明提供了一種新型醒酒肽以及含有該醒酒肽的醒酒產(chǎn)品，其醒酒作用明顯，且采用香菇足為原料，生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)效益高。