[發(fā)明專利]Ⅰ型擬除蟲菊酯流動(dòng)滯后免疫時(shí)間分辨熒光速測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710107589.9
• 申請(qǐng)日: 2017-02-27
• 公開（公告）號(hào): CN106932586B
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李培武;張奇;唐曉倩;李慧;姜俊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所
• 主分類號(hào): G01N33/58
• 分類號(hào): G01N33/58
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 喬宇

1.Ⅰ型擬除蟲菊酯流動(dòng)滯后免疫時(shí)間分辨熒光速測(cè)試劑盒，其特征在于：它包括熒光試紙條和含有銪標(biāo)記的抗Ⅰ型擬除蟲菊酯通用單克隆抗體凍干品的樣品反應(yīng)瓶，其中：所述的熒光試紙條包括紙板，紙板的一面從上到下依次粘貼吸水墊、檢測(cè)墊和樣品墊，相鄰各墊在連接處交疊連接，所述檢測(cè)墊以硝酸纖維素膜為基墊，硝酸纖維素膜上自上而下設(shè)置橫向質(zhì)控線和檢測(cè)線，所述質(zhì)控線包被有兔抗鼠多克隆抗體，所述檢測(cè)線上包被Ⅰ型擬除蟲菊酯完全抗原；

所述的抗Ⅰ型擬除蟲菊酯通用單克隆抗體由保藏編號(hào)為CCTCC NO.C2016164的雜交瘤細(xì)胞株QW8#分泌產(chǎn)生，所述的雜交瘤細(xì)胞株QW8#于2016年8月30日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，保藏地址是，中國，武漢，武漢大學(xué)，保藏編號(hào)為CCTCC NO.C2016164。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的Ⅰ型擬除蟲菊酯流動(dòng)滯后免疫時(shí)間分辨熒光速測(cè)試劑盒，其特征在于：所述的Ⅰ型擬除蟲菊酯完全抗原結(jié)構(gòu)式為

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的Ⅰ型擬除蟲菊酯流動(dòng)滯后免疫時(shí)間分辨熒光速測(cè)試劑盒，其特征在于：所述銪標(biāo)記的抗Ⅰ型擬除蟲菊酯通用單克隆抗體是按照以下方法制得：將抗Ⅰ型擬除蟲菊酯通用單克隆抗體用碳酸鹽緩沖溶液透析后和銪標(biāo)記試劑以質(zhì)量比為0.5～2:1的比例充分混勻后靜置過夜，然后經(jīng)Sephadex G-50層析柱分離銪標(biāo)記的抗醚菊酯通用單克隆抗體，洗脫，收集目標(biāo)產(chǎn)物。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的Ⅰ型擬除蟲菊酯流動(dòng)滯后免疫時(shí)間分辨熒光速測(cè)試劑盒，其特征在于：所述熒光試紙條中的吸水墊長15～20mm，寬3～4mm；檢測(cè)墊長25～30mm，寬3～4mm；樣品墊長12～18mm，寬3～4mm，相鄰各墊的交疊長度為1～3mm；

所述熒光試紙條中檢測(cè)墊上的檢測(cè)線與硝酸纖維素膜上沿的間距為15～20mm，質(zhì)控線和檢測(cè)線的間距為5～10mm；所述的樣品反應(yīng)瓶為1-5mL的卡口瓶。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的Ⅰ型擬除蟲菊酯流動(dòng)滯后免疫時(shí)間分辨熒光速測(cè)試劑盒，其特征在于：所述熒光試紙條中檢測(cè)墊上每厘米檢測(cè)線所需的Ⅰ型擬除蟲菊酯完全抗原包被量為480-1000ng；每厘米質(zhì)控線所需的兔抗鼠多克隆抗體的包被量為100-900ng；所述樣品反應(yīng)瓶中銪標(biāo)記的抗Ⅰ型擬除蟲菊酯通用單克隆抗體凍干品的含量為0.2-1.0μg。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的Ⅰ型擬除蟲菊酯流動(dòng)滯后免疫時(shí)間分辨熒光速測(cè)試劑盒，其特征在于：所述的熒光試紙條是采用以下方法獲得的：

(1)將吸水紙剪裁得吸水墊；

(2)檢測(cè)墊的制備：

將Ⅰ型擬除蟲菊酯完全抗原配制成濃度為0.2-1.0mg/mL的包被液，用線噴方式將其橫向包被于硝酸纖維素膜上，得到檢測(cè)線，然后于37～40℃條件下干燥30～60分鐘；將兔抗鼠多克隆抗體配成濃度為0.10-0.80mg/mL的包被液，用線噴方式將其橫向包被于硝酸纖維素膜上，得質(zhì)控線，然后于37～40℃條件下干燥30～60分鐘；

(3)樣品墊的制備：

將玻璃纖維膜放入封閉液中浸濕，取出，于37～40℃條件下干燥3～6小時(shí)，得樣品墊，然后置干燥器中室溫保存；

(4)熒光試紙條的組裝：

在紙板的一面從上到下依次粘貼吸水墊、檢測(cè)墊、樣品墊，相鄰各墊在連接處交疊連接，即得熒光試紙條。