[發明專利]一種抑制前蛋白轉化酶枯草溶菌素9表達的方法

在審

• 申請號: 201710106759.1
• 申請日: 2017-02-27
• 公開（公告）號: CN106822864A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 譚樹華;古麗麗;王玥;田清華;趙成;許雅瓊;潘沁
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K38/16
• 分類號: A61K38/16;A61K45/06;A61P3/06;A61P3/10;A61P3/04;A61P13/12
• 代理公司: 南京艾普利德知識產權代理事務所(特殊普通合伙)32297
• 代理人: 張鉑

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種抑制前蛋白轉化酶枯草溶菌素9(PCSK9)表達的方法，可通過使用露那辛(lunasin)抑制機體前蛋白轉化酶枯草溶菌素9的產生，降低前蛋白轉化酶枯草溶菌素9的血清水平?？蛇M一步將露那辛作為前蛋白轉化酶枯草溶菌素9抑制劑用于制備治療前蛋白轉化酶枯草溶菌素9介導的相關疾病的藥物。

背景技術

前蛋白轉化酶枯草溶菌素9(PCSK9)(proprotein convertase subtilisin/kexin 9,PCSK9)是一種由692個氨基酸組成的糖蛋白，屬前蛋白轉化酶(proprotein convertases,PCs)家族中的第九個成員，是一種分泌型絲氨酸蛋白酶，主要在肝臟和腸道等組織中表達，然后分泌到血液中(J Biol Chem.2004；279(47):48865-48875；Trends Biochem Sci.2007；32(2):71-77)。PCSK9進入血液循環后可與肝細胞表面的低密度脂蛋白受體(low density lipoprotein receptor,LDL-R)的表皮生長因子樣結構域特異性結合，引導其進入肝細胞到達溶酶體，使LDL-R在溶酶體中降解，從而導致肝細胞表面LDL-R減少，進而降低肝臟結合和清除LDL-C的能力，最終導致血液中LDL-C水平升高(Proc Natl Acad Sci U S A.2008；105(35):13045-13050)。因此，可通過抑制PCSK9治療高膽固醇血癥(Annu Rev Pharmacol Toxicol.2014；54:273-293)。此外，最新研究顯示，PCSK9升高與肥胖及2型糖尿病(Pediatr Diabetes.2017.PMID:28093849,DOI:10.1111/pedi.12490；Diabetes Metab Res Rev.2016；32(2):193-199.)密切相關，也與腎病綜合癥及蛋白尿等慢性腎病(Int Urol Nephrol.2017.PMID:28084558，DOI:10.1007/s11255-017-1505-2)密切相關，因此，通過抑制PCSK9可以成為預防和治療這些與其相關的疾病的重要手段。

目前已有多種PCSK9抑制劑處于研發階段或已獲批上市成為治療高膽固醇血癥的藥物，其中主要包括：1、抗PCSK9抗體抑制劑，如美國Amgen公司的Evolocumab(AMG145)及Regeneron/Sanofi公司的Alirocumab(REGN727/SAR236553)已在美國和歐洲獲批上市(J Clin Pharmacol.2017；57(1):7-32)；2、小干擾RNA(SiRNA)抑制劑，如Alnylam公司的ALN-PCS可抑制PCSK9的轉錄，目前已進入I期臨床試驗(Pharmacol Ther.2016；164:183-194)；3、小分子化合物，如小檗堿可以抑制PCSK9的轉錄和翻譯(J Biol Chem.2015；290(7):4047-4058；Atherosclerosis.2008；201(2):266-273)。

露那辛(lunasin)是一種最初從大豆中分離得到的活性肽，由43個氨基酸殘基組成，其序列為:SKWQHQQDSCRKQLQGVNLTPCEKHIMEKIQGRGDDDDDDDDD(SEQ ID NO:1)，分子量為5KDa(J Biol Chem.1987；262(22):10502-10505)。已有研究表明，多肽露那辛具有抗腫瘤活性，在體外可抑制非小細胞肺癌細胞的增殖(Oncotarget.2015；6(7):4649-4662)，抑制乳腺癌細胞的遷移和侵襲(Oncol Rep.2016；36(1):253-262)，在體內可抑制小鼠皮膚癌和乳腺癌的發生(J Food Sci.2010；75(9):H311-316)。

發明內容

本發明的目的在于提供一種抑制PCSK9的方法，具體說是通過用多肽露那辛(lunasin)抑制肝細胞組織中前蛋白轉化酶枯草溶菌素9(PCSK9)表達的方法。PCSK9是一種分泌型絲氨酸蛋白酶，主要在肝臟、小腸等組織中表達后分泌到血液中，現已發現PCSK9與高膽固醇血癥、肥胖、2型糖尿病、腎病綜合癥及蛋白尿等慢性腎病密切相關，本發明提供了一種采用多肽露那辛有效抑制PCSK9生成的方法，可應用于制備上述與PCSK9相關的疾病的制劑或藥物。

本發明具體技術方案如下：