[發明專利]大豆花藥、胚珠及根冠特異啟動子GmFTL2及其應用

有效

• 申請號: 201710104144.5
• 申請日: 2017-02-24
• 公開（公告）號: CN106906216B
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發明（設計）人: 傅永福;張曉玫;陳福祿;劉麗敏
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院作物科學研究所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/82;C12N15/11;A01H5/02;A01H5/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

本發明公開了一種大豆花藥、胚珠及根冠特異啟動子GmFTL2，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本發明還提供所述啟動子在調控下游基因表達中的應用。利用啟動子GmFTL2在擬南芥中過表達GUS基因，結果表明啟動子GmFTL2可明顯促進植物花藥、胚珠及根冠中GUS基因的表達量，因而GmFTL2啟動子在植物花藥、胚珠及根冠中具有特異性，適合在各種作物、林木、蔬菜、花卉、牧草等植物的花藥、胚珠及根冠中特異表達目標基因。

技術領域

本發明屬于分子生物學、基因工程技術領域，具體地，涉及一種大豆花藥、胚珠及根冠特異啟動子GmFTL2及其應用。

背景技術

啟動子是基因中重要的順式作用元件，一般位于轉錄起始位點上游幾十個堿基處。根據轉錄模式不同可將啟動子分為三種：組成型啟動子、組織或器官特異性啟動子和誘導型啟動子。組織或器官特異性啟動子的活性是受特定的組織細胞結構和化學、物理信號誘導調節的，即這類啟動子的表達具有特定的時空性。在這類啟動子的驅動下，基因的表達往往只限于某些特定的器官或組織部位或特定的發育時期。組織或器官特異性啟動子不僅能使目的基因的表達產物在一定器官或組織部位積累，提高區域表達量，同時也可以避免目標基因在其他組織器官中表達造成的不利影響。

目前為止，已有大量的組織或器官特異性啟動子被分離出來，其中包括花特異啟動子和種子特異啟動子。如花粉發育有關的組織特異性啟動子如TA29、Lat52、Osg6B、Zm13、S1等已有詳細研究報道；UBC6啟動子(Watts，1994)主要在花中表達；Tsp1是水稻中絨氈層特異啟動子(馬沁沁，2005)；DefH9是子房特異啟動子(Rotino，1997)；PtNIP1是柏樹胚胎發育特異性啟動子(Vincent，2002)。這些啟動子都能特異啟動目標基因的表達，改變特異組織器官的發育。但在大豆的花藥、胚珠及根冠中特異表達的啟動子鮮有報道。

成花過程是植物從營養生長向生殖生長的關鍵轉折期，包括開花誘導、花的發端和花器官發育三個階段，受眾多基因調控。在擬南芥中FT(Flowering Locus T)基因是成花素基因，在誘導植物成花的過程中起著重要的作用，然而大豆中FT有6個以上的同源基因，這些基因功能冗余還是否存在功能分化尚未知曉，因此有必要研究和獲得調控大豆FT同源基因的啟動子序列，從而為深入研究大豆成花過程及其它發育過程提供有效手段和途徑。

發明內容

本發明的目的是提供一種來自大豆的組織或器官特異性啟動子GmFTL2，從而為在各種作物、林木、蔬菜、花卉、牧草等植物的花藥、胚珠及根冠中特異表達目標基因提供有效途徑。

為了實現本發明目的，本發明提供一種大豆花藥、胚珠及根冠特異啟動子GmFTL2，其核苷酸序列為：

i)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；或

ii)SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列經取代、缺失和/或增加一個或多個核苷酸且具有相同功能的核苷酸序列；或

iii)在嚴格條件下與SEQ ID NO:1所示序列雜交且具有相同功能的核苷酸序列，所述嚴格條件為在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下雜交，并用該溶液洗膜；或

iv)與i)、ii)或iii)的核苷酸序列具有90％以上同源性且具有相同功能的核苷酸序列。

應當理解，本領域技術人員可根據本發明公開的啟動子序列，在不影響其活性的前提下，取代、缺失和/或添加一個或幾個核苷酸，得到所述啟動子GmFTL2的突變序列。例如，將第70位的G取代為C、將第2507位的A取代為T、將第3719位的T取代為A、將第8378位的T取代為A。

本發明還提供含有所述啟動子GmFTL2的表達盒。

本發明還提供含有所述啟動子GmFTL2的載體。