[發明專利]金納米-脂質體復合納米顆粒及其藥物組合物和應用

在審

• 申請號: 201710102989.0
• 申請日: 2017-02-24
• 公開（公告）號: CN108498461A
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發明（設計）人: 蔣興宇;王鵬;鄭文富;張靈敏
• 申請（專利權）人: 國家納米科學中心
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/24;A61K47/02;A61K47/46;A61K48/00;A61K38/46;A61P35/00;C12N15/85
• 代理公司: 北京市英智偉誠知識產權代理事務所(普通合伙) 11521
• 代理人: 劉丹妮

本發明提供一種金納米?脂質體復合納米顆粒，所述納米顆粒為由脂質體囊泡包裹的金納米顆粒，所述脂質體囊泡的表面修飾有二硬脂?；字Ｒ掖及?聚乙二醇，所述金納米顆粒表面修飾有質粒和穿膜肽，所述脂質體囊泡由二油酰磷脂酰乙醇胺、2,3?二油氧基丙基三甲基氯化銨和膽固醇組成。本發明還提供了所述金納米?脂質體復合納米顆粒的制備方法及其包括所述金納米?脂質體復合納米顆粒的一種藥物組合物。本發明提供的金納米?脂質體復合納米顆粒作為載體具有較高的轉染效果，本發明提供的藥物組合物對于多種腫瘤具有較好的治療效果。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域。具體而言，本發明提供了一種金納米-脂質體復合納米顆粒及其藥物組合物和應用。

背景技術

目前，在多種腫瘤的基因治療中，常用載體主要有病毒載體和非病毒載體。雖然病毒載體展現了優秀的基因轉染效率，但是它們可能引發突變和其它致癌作用。再者，病毒載體的重復使用可能誘發免疫缺失。而常用的非病毒載體包括聚合物，納米顆粒(磁性納米粒子、金納米顆粒、具有不同表面修飾的碳納米顆粒)和商業試劑(Lipofectamine2000,Lipofectamine3000)等，轉染效率較低，不能對癌癥起到很好的基因治療效果。而目前金納米顆粒的使用很大程度的用于腫瘤的光熱治療，在基因治療方面的應用也僅用于載體。

CRISPR/Cas9系統是一個多功能的基因編輯平臺，在治療具有挑戰性的疾病(如癌癥)時有潛在的優勢。但由于常用的Cas9蛋白尺寸較大，目前的常用載體很難對其進行高效的遞送，限制了其在基礎研究和治療的應用。

因此，尋找一種合適的載體將治療腫瘤的藥物(如CRISPR/Cas9系統)高效地遞送到腫瘤病灶，就顯得尤為重要。

發明內容

因此，基于上述已有技術的缺陷，本發明的目的是提供一種金納米-脂質體復合納米顆粒及其藥物組合物和應用。

針對上述發明目的，本發明是通過下述技術方案實現的：

本發明提供一種金納米-脂質體復合納米顆粒，其中，所述納米顆粒為由脂質體囊泡包裹的金納米顆粒，所述脂質體囊泡的表面修飾有二硬脂?；字Ｒ掖及?聚乙二醇(DSPE-PEG2000)，所述金納米顆粒表面修飾有穿膜肽和質粒，所述脂質體囊泡由二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、2,3-二油氧基丙基三甲基氯化銨(DOTAP)和膽固醇組成。

優選地，根據前述的金納米-脂質體復合納米顆粒，其中，所述穿膜肽為HIV-1-transactivator轉錄肽。更優選地，根據前述的金納米-脂質體復合納米顆粒，其中，所述金納米顆粒的粒徑為10～20nm。

再優選地，根據前述的金納米-脂質體復合納米顆粒，其中，所述金納米顆粒和所述質粒的摩爾比為0.1～1000：0.1～10000000，優選為0.1～100：1～100000，更優選為0.1～10:5000～100000，還優選為1～1000：50000。

還優選地，根據前述的金納米-脂質體復合納米顆粒，其中，所述脂質體囊泡中的二油酰磷脂酰乙醇胺、2,3-二油氧基丙基三甲基氯化銨和膽固醇摩爾比為0.1～4：0.1～8：0.1～9，優選為0.2～4：0.1～5：0.1～6。

本發明提供一種前述的金納米-脂質體復合納米顆粒的制備方法，其中，所述方法包括：(1)按照配比，將穿膜肽，質粒與金納米顆粒混合后靜止獲得第一混合液，(2)按照配比，將步驟(1)獲得的第一混合液與脂質體囊泡混合后靜止獲得第二混合液，(3)按照配比，將步驟(2)獲得的第二混合液與二硬脂?；字Ｒ掖及?聚乙二醇混合獲得所述脂質體納米顆粒。優選地，步驟(1)、(2)的靜止時間和/或(3)的混合時間為15-30分鐘。其中，步驟(1)中穿膜肽、質粒與金納米顆粒可在水、PBS或葡萄糖溶液中進行混合。步驟(3)中所述混合溫度可為55℃。