[發明專利]一種納米材料的制備及其基因載體系統的制備方法

有效

• 申請號: 201710102510.3
• 申請日: 2017-02-24
• 公開（公告）號: CN106916316B
• 公開（公告）日: 2019-12-24
• 發明（設計）人: 梁繼超;熊華玉;杜春園;陳勇
• 申請（專利權）人: 湖北大學
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;C08G83/00;B22F9/24;B82Y40/00;B82Y30/00
• 代理公司: 42212 武漢河山金堂專利事務所(普通合伙)
• 代理人: 胡清堂

1.一種納米材料制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

1)將支鏈型聚乙烯亞胺(PEI)加入到去離子水中，攪拌一小時至其充分溶解，得到溶液A，所述溶液A中支鏈型聚乙烯亞胺(PEI)的濃度為0.25-1mM，支鏈型聚乙烯亞胺(PEI)的分子量為25000；

2)將硝酸銀加入到去離子水中，攪拌至充分溶解，得到溶液B，所述溶液B中硝酸銀的濃度為0.25-1mM；

3)將所述A、B溶液進行等體積混合，在磁力攪拌器下，于25-35℃慢速攪拌1-3小時；

4)用醋酸將步驟3)所得混合液pH調至3.0-5.0，再加入抗壞血酸，攪拌均勻；

5)將步驟4)得到的混合液置于258nm的紫外燈下4-8小時；

6)用步驟5)所得混合液200倍體積的二次去離子水，再用截留分子量為8000-14000的透析袋透析48小時，磁力攪拌器室溫攪拌，每隔6小時更換二次去離子水透析，透析袋內為所需PEI-Ag納米簇，即納米材料。

2.一種納米材料，其特征在于，根據權利要求1所述的制備方法制得。

3.一種納米材料基因載體系統的制備方法，其特征在于，在N/P比為0.5-10的范圍內，將根據權利要求2所述納米材料PEI-Ag納米簇，與核酸進行混合，室溫放置10分鐘，得到PEI-Ag納米簇-核酸復合體，即納米材料基因載體系統。

4.根據權利要求3所述納米材料基因載體系統的制備方法，其特征在于：所述核酸為質粒DNA、microRNA mimics、microRNA inhibitors中的一種。

5.根據權利要求4所述納米材料基因載體系統的制備方法，其特征在于：所述質粒RNA、microRNA mimics及microRNA inhibitors均用無血清DMEM培養基或MEM培養基稀釋。

6.根據權利要求3-5中任一項所述納米材料基因載體系統的制備方法，其特征在于：所述PEI-Ag納米簇根據對應混合的核酸，所述PEI-Ag納米簇-核酸復合體相應為PEI-Ag納米簇-質粒DNA復合體、PEI-Ag納米簇-microRNA mimics復合體或PEI-Ag納米簇-microRNAinhibitors復合體中的一種。

7.一種納米材料基因載體系統，其特征在于，根據權利要求3-6中任一權利要求所述納米材料基因載體系統的制備方法制得。

8.根據權利要求7所述納米材料基因載體系統在基因轉染上的應用。