[發明專利]新的肺特異性轉移肝癌細胞及其制備有效
| 申請號: | 201710100755.2 | 申請日: | 2017-02-23 |
| 公開(公告)號: | CN108467855B | 公開(公告)日: | 2021-09-07 |
| 發明(設計)人: | 王慧;李曉光;高志虎 | 申請(專利權)人: | 中國科學院上海營養與健康研究所 |
| 主分類號: | C12N5/09 | 分類號: | C12N5/09;C12Q1/02;A01K67/027;A61K49/00;C12R1/91 |
| 代理公司: | 上海一平知識產權代理有限公司 31266 | 代理人: | 劉妍珺;陸鳳 |
| 地址: | 200031 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 特異性 轉移 肝癌 細胞 及其 制備 | ||
1.一種肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM,其特征在于,所述細胞3B-LM是中國典型培養物保藏中心的保藏號為CCTCC NO:C2016173的HEP-3B器官特異性轉移細胞系LM,并且所述細胞的肺轉移率≥80%;和/或所述細胞的肺以外臟器轉移率<20%。
2.如權利要求1所述肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM,所述肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM或其子代細胞具有以下一個或多個特性:
(a)所述的細胞具有特定的miRNA表達譜,所述的miRNA表達譜包括以下特征:
(b)所述細胞的基因表達具有如下特征:
其中,所述的子代細胞是3B-LM細胞經過10代以內傳代的子代細胞。
3.權利要求1所述肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM或其子代細胞的用途,其特征在于,用于制備非人哺乳動物的肺特異性轉移肝癌模型或用于篩選治療肺特異性轉移肝癌的候選化合物,其中,所述的子代細胞是3B-LM細胞經過10代以內傳代的子代細胞。
4.如權利要求3所述的用途,其特征在于,所述的哺乳動物選自大鼠、小鼠、兔、羊、狗、猴子。
5.如權利要求3所述的用途,其特征在于,所述的哺乳動物是免疫缺陷實驗動物。
6.一種篩選治療肺特異性轉移肝癌的候選化合物的方法,其特征在于,包括步驟:
(a1)測試組中,在權利要求1所述的肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM的培養體系中添加測試化合物,并觀察肺特異性轉移肝癌細胞的數量和/或生長情況;在對照組中,在肺特異性轉移肝癌細胞的培養體系中不添加測試化合物,并觀察肺特異性轉移肝癌細胞的數量和/或生長情況;
其中,如果測試組中肺特異性轉移肝癌細胞的數量或生長速度小于對照組,就表明該測試化合物是對肺特異性轉移肝癌細胞的生長或增殖有抑制作用的治療肺特異性轉移肝癌的候選化合物。
7.一種篩選潛在的肝癌肺轉移相關基因的方法,其特征在于,包括步驟:
將權利要求1所述肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM或其子代細胞中表達的基因與正常肝細胞中表達的基因比較,篩選出權利要求1所述肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM中在統計學上表達上調或下調的基因,該基因為潛在的肺特異性轉移肝癌相關基因。
8.如權利要求7所述的方法,其特征在于,所述的方法還包括:
對所獲得的潛在的肺特異性轉移肝癌相關基因進行進一步的細胞實驗和/或動物實驗,以選出對于肝癌肺轉移起確切作用的基因。
9.一種體外培養肺特異性轉移肝癌細胞系3B-LM的方法,其特征在于,包括步驟:在適合的培養基中,培養權利要求1所述的肺特異性轉移肝癌細胞3B-LM或其子代細胞,其中,所述的子代細胞是3B-LM細胞經過10代以內傳代的子代細胞。
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