[發(fā)明專利]一種同時檢測干血濾紙片中多種維生素的方法和試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710100120.2
• 申請日: 2017-02-23
• 公開（公告）號: CN106770802B
• 公開（公告）日: 2020-02-21
• 發(fā)明（設計）人: 楊緒慶;汪勤;沈健;李智強;胡愛武
• 申請（專利權）人: 廣州市豐華生物工程有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;宋靜娜

1.一種同時檢測干血濾紙片中多種脂溶性和水溶性維生素的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將干血濾紙片標本和提取液混合后振蕩孵育，然后離心，取上清液；

(2)將步驟(1)所得上清液與流動相和內標混合液混勻后采用串聯(lián)質譜法進行檢測，通過比較維生素和維生素的內標的離子強度來得出待測干血濾紙片中維生素的含量；其中，

所述步驟(1)中提取液包括以下體積百分比的組分：84.75～98.95％的甲醇、1～15％的水和0.05～0.25％的甲酸；或者提取液包括以下體積百分比的組分：20～79％的乙醇、20～70％的甲醇和1～10％的水；

所述步驟(2)中色譜條件包括：流動相包括以下體積百分比的組分：79.64～97.989％的乙腈、2～20％的水、0.01～0.35％的甲酸，以及0.001～0.01％的全氟丁酸；或者流動相包括以下體積百分比的組分：49.71～84.989％的甲醇、15～50％的乙腈、0.01～0.28％的甲酸，以及0.001～0.01％的全氟丁酸；

所述多種脂溶性維生素為維生素A、維生素D2、維生素D3、25－羥基維生素D2、25－羥維基生素D3、維生素E和維生素K1，所述多種水溶性維生素為煙酸胺、煙酸、維生素B1、維生素B2、鹽酸吡哆醇、鹽酸吡哆胺、鹽酸吡哆醛和葉酸；

所述步驟(2)中色譜條件包括：探針洗液是體積濃度為50～80％的乙腈水溶液，或者探針洗液是體積濃度為50～80％的甲醇水溶液；

所述內標混合液包括維生素B1內標、葉酸內標、維生素A內標、25－羥基維生素D2內標、25－羥基維生素D3內標、維生素E內標和維生素K1內標。

2.根據(jù)權利要求1所述的同時檢測干血濾紙片中多種脂溶性和水溶性維生素的方法，其特征在于，所述步驟(1)中干血濾紙片標本的采集方法為：將新鮮全血滴到定量濾紙片上，使血滴分布均勻，濾紙片晾干后密封保存?zhèn)溆谩?/p>

3.一種同時檢測干血濾紙片中多種脂溶性和水溶性維生素的試劑盒，其特征在于，包括：內標混合液、提取液、流動相和探針洗液，其中，所述提取液包括以下體積百分比的組分：84.75～98.95％的甲醇、1～15％的水和0.05～0.25％的甲酸；或者提取液包括以下體積百分比的組分：20～79％的乙醇、20～70％的甲醇和1～10％的水；所述流動相包括以下體積百分比的組分：79.64～97.989％的乙腈、2～20％的水、0.01～0.35％的甲酸，以及0.001～0.01％的全氟丁酸；或者流動相包括以下體積百分比的組分：49.71～84.989％的甲醇、15～50％的乙腈、0.01～0.28％的甲酸，以及0.001～0.01％的全氟丁酸；

所述多種脂溶性維生素 為維生素A、維生素D2、維生素D3、25－羥基維生素D2、25－羥維基生素D3、維生素E和維生素K1，所述多種水溶性維生素為煙酸胺、煙酸、維生素B1、維生素B2、鹽酸吡哆醇、鹽酸吡哆胺、鹽酸吡哆醛和葉酸；

所述探針洗液是體積濃度為50～80％的乙腈水溶液，或者探針洗液是體積濃度為50～80％的甲醇水溶液；所述內標混合液包括維生素B1內標、葉酸內標、維生素A內標、25－羥基維生素D2內標、25－羥基維生素D3內標、維生素E內標和維生素K1內標。