[發明專利]一種同時檢測血清/血漿中多種維生素的方法和試劑盒

有效

• 申請號: 201710099994.0
• 申請日: 2017-02-23
• 公開（公告）號: CN106645500B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 汪勤;楊緒慶;沈健;李智強;胡愛武
• 申請（專利權）人: 廣州市豐華生物工程有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 郝傳鑫;宋靜娜

本發明公開了一種可以同時檢測血清/血漿中多種維生素的方法，包括如下步驟：(1)將待測血清或待測血漿與去蛋白液混勻后離心，取上清液；(2)將步驟(1)所得上清液和內標混合液混勻后采用串聯質譜法進行檢測，通過比較維生素和維生素的內標的離子強度來得出待測血清或待測血漿中維生素的含量；另外，本發明還公開了一種同時檢測血清/血漿中多種維生素的試劑盒，其包括內標混合液、去蛋白液、流動相和探針洗液；本發明的方法可從血清/血漿將多種水溶性和脂溶性維生素提取出來，利用串聯質譜儀在2～3min內對1個標本中十余種維生素同時進行定量，檢測周期顯著縮短，并且維生素的檢測結果有更高的精密度和準確度。

技術領域

本發明涉及維生素檢測技術，尤其是一種可以同時檢測血清/血漿中多種維生素的方法和試劑盒。

背景技術

維生素(vitamin)是人和動物為維持正常的生理功能而必需從食物中獲得的一類有機物質，在人體生長、代謝過程中發揮著重要的作用。機體缺乏維生素將引起代謝障礙，并發生各種疾病,這類疾病統稱為維生素缺乏癥。目前，根據溶解性可將維生素分為脂溶性維生素和水溶性維生素兩大類，水溶性維生素包括B族維生素、維生素C等；脂溶性維生素包括維生素A、D、E、K等。

脂溶性維生素中，維生素A是視網膜中感光細胞的感光物質的主要成分，維生素A缺乏會導致干眼癥，對于成人，維生素A缺乏時易導致夜盲癥；維生素D(VitaminD，VitD)對人類健康特別是兒童健康具有重要意義,VitD缺乏性佝僂病是我國兒童重點防治的四病之一，臨床發現VitD缺乏性佝僂病除骨骼病變外,同時可影響神經、肌肉、造血及免疫等組織器官的功能；維生素E有抗氧化的作用，能防止不飽和脂肪酸的自身氧化，因而有保護生物膜的功能，使生物膜中的不飽和脂肪酰不致于因氧化變硬，使膜遭到破壞；維生素K對正常的血液凝結有重要作用,缺乏維生素K會出現血凝緩慢，甚至可導致大出血。

水溶性維生素主要包括B族維生素和維生素C等，比如B₁(硫胺素)、B₂(核黃素)、B₅(泛酸)、B₆(吡哆醛等)、B₁₂(鈷胺素)、煙酸(尼可酸)、生物素，葉酸等；B族維生素在生物體內通過構成輔酶而影響物質代謝，如在細胞呼吸中起重要作用。

維生素最早期的檢測用于一般的添加食品，如嬰兒配方食品、谷類產品和果汁等。European Directive 2002/46 EC制定了一系列關于食品添加劑標識及檢測添加過維生素的食品中標注的維生素含量的法規。我國國家標準GB5413～2010對嬰幼兒配方食品與乳品中維生素含量也有明確的規定，標準中涉及的方法有微生物法及高效液相色譜法。關于維生素的檢測，傳統方法為微生物法，其靈敏度高、結果準確，但該方法有許多局限性：整個實驗周期長，批次檢測結果重復性差，檢測結果誤差較大，并且每次只能進行單一維生素種類的檢測；而最近，液相串聯質譜技術的發展使得維生素的檢測進入了一個全新的領域，近幾年來串聯質譜技術在國內醫療市場的占有率愈來愈高，使得串聯質譜在臨床疾病的診斷中得到普及。

發明內容

基于此，本發明的目的在于克服上述現有技術的不足之處而提供一種可以同時檢測血清/血漿中多種維生素的方法和試劑盒，該方法具有更高的精密度和準確度，檢測效率顯著提升。

為實現上述目的，本發明采取的技術方案為：一種同時檢測血清/血漿中多種維生素的方法，包括如下步驟：

(1)將待測血清或待測血漿與去蛋白液混勻后離心，取上清液；

(2)將步驟(1)所得上清液和內標混合液混勻后采用串聯質譜法進行檢測，通過比較維生素和維生素的內標的離子強度來得出待測血清或待測血漿中維生素的含量。應當說明的是，本發明中的串聯質譜法采用液相色譜串聯質譜聯用儀。