[發明專利]一種CRISPR/nCas9介導的定點堿基替換在植物中的應用有效
| 申請號： | 201710098892.7 | 申請日： | 2017-02-23 |
| 公開（公告）號： | CN107043779B | 公開（公告）日： | 2020-05-12 |
| 發明（設計）人： | 夏蘭琴;孫永偉;趙云德;李晶瑩;杜晉魯 | 申請（專利權）人： | 中國農業科學院作物科學研究所 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢;白艷 |
| 地址： | 100081 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 crispr ncas9 定點 堿基 替換 植物 中的 應用 | ||
1.CRISPR/nCas9系統、脫氨酶、尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白和植物基因表達啟動子在定點編輯植物基因中的應用；
所述植物基因表達啟動子啟動CRISPR/nCas9系統中nCas9核酸酶、脫氨酶和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的表達；
所述脫氨酶為APOBEC1，其編碼基因序列為序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的編碼基因序列為序列1的第392-688位；
所述nCas9核酸酶的編碼基因序列為序列1的第689-4789位；
所述植物基因表達啟動子的核苷酸序列為序列1的第5545-7535位；
所述待編輯基因為OsSBEIIb和OsPDS。
2.CRISPR/nCas9系統、脫氨酶和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白在定點編輯植物基因中的應用；
所述脫氨酶為APOBEC1，其編碼基因序列為序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的編碼基因序列為序列1的第392-688位；
所述待編輯基因為OsSBEIIb和OsPDS。
3.由nCas9核酸酶、脫氨酶和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白組成的融合蛋白、待編輯基因的sgRNA和植物基因表達啟動子在定點編輯植物基因中的應用；
所述植物基因表達啟動子驅動由所述nCas9核酸酶、所述脫氨酶和所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白組成的融合蛋白的編碼基因的表達；
所述脫氨酶為APOBEC1，其編碼基因序列為序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的編碼基因序列為序列1的第392-688位；
所述nCas9核酸酶的編碼基因序列為序列1的第689-4789位；
所述植物基因表達啟動子的核苷酸序列為序列1的第5545-7535位；
所述待編輯基因為OsSBEIIb和OsPDS；
所述sgRNA的核苷酸序列為序列1第7785-8268位或序列2第7785-8268位或序列3第7785-8268位。
4.由nCas9核酸酶、脫氨酶、連接所述nCas9核酸酶與所述脫氨酶的連接肽和尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白組成的融合蛋白、待編輯基因的sgRNA和植物基因表達啟動子在定點編輯植物基因中的應用；
所述植物基因表達啟動子驅動由所述nCas9核酸酶、所述脫氨酶、所述連接肽和所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白組成的融合蛋白的編碼基因的表達；
所述脫氨酶為APOBEC1，其編碼基因序列為序列1的第4838-5524位；
所述尿嘧啶DNA糖基化酶抑制蛋白的編碼基因序列為序列1的第392-688位；
所述nCas9核酸酶的編碼基因序列為序列1的第689-4789位；
所述連接肽的編碼基因序列為序列1的第4790-4837位；
所述植物基因表達啟動子的核苷酸序列為序列1的第5545-7535位；
所述融合蛋白的編碼基因序列為序列1的第392-5524位；
所述待編輯基因為OsSBEIIb和OsPDS；
所述sgRNA的核苷酸序列為序列1的第7785-8268位或序列2的第7785-8268位或序列3的第7785-8268位。
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