[發明專利]一種利用微生物發酵生產ARA的方法

有效

• 申請號: 201710097797.5
• 申請日: 2017-02-23
• 公開（公告）號: CN106755151B
• 公開（公告）日: 2021-03-23
• 發明（設計）人: 文昌;陳必欽;王炳榮;王躍飛;蔣四富;徐魯明;吳軼
• 申請（專利權）人: 內蒙古金達威藥業有限公司;廈門金達威集團股份有限公司
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C11B1/02;C11B1/06;C11B3/12;C11B3/10;C11B3/00;C12R1/645
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 劉海羅

1.一種培養用于生產ARA的微生物的方法，其中：

從發酵罐培養的110－130小時開始，發酵溫度為20－24℃；其中，在發酵溫度為20－24℃之前，發酵溫度為26－30℃；

和/或

從發酵罐培養的第8－10天開始，停止通氣或者將通氣量減少90％以上；其中，在停止通氣或者將通氣量減少90％以上的同時或之后，發酵液中葡萄糖的濃度為1－2g/L；在停止通氣或者將通氣量減少90％以上的同時或之后，停止攪拌；在停止通氣或者將通氣量減少90％以上之前，濾去發酵液，并加入適量水或新鮮的發酵培養基；

其中，所述用于生產ARA的微生物為高山被孢霉，所述高山被孢霉是保藏號為ATCCNo.42430的菌株。

2.根據權利要求1所述的培養方法，其中，保持發酵溫度為20－24℃直至發酵結束。

3.根據權利要求1所述的培養方法，其中，保持停止通氣或者將通氣量減少90％以上直至發酵結束。

4.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的115－125小時開始，發酵溫度為20－24℃。

5.根據權利要求1所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的120小時開始，發酵溫度為20－24℃。

6.根據權利要求1至5中任一權利要求所述的培養方法，其中：

從發酵罐培養的第8天、第9天或者第10天開始，停止通氣或者將通氣量減少90％以上。

7.根據權利要求1至5中任一權利要求所述的培養方法，其中，發酵液的pH為6.0－7.0。

8.根據權利要求1至5中任一權利要求所述的培養方法，其中，在停止通氣或者將通氣量減少90％以上之前，發酵液中葡萄糖的濃度為1－5g/L。

9.根據權利要求1至5中任一權利要求所述的培養方法，其中，在停止通氣或者將通氣量減少90％以上的同時或之后，發酵溫度為20－24℃。

10.根據權利要求1至5中任一權利要求所述的培養方法，其中，所述發酵罐培養還包括在發酵罐培養起始的36－60小時，進行分罐培養的步驟。

11.根據權利要求10所述的培養方法，其中，所述分罐培養為分為兩個或更多個發酵罐進行發酵罐培養。

12.根據權利要求1至5中任一權利要求所述的培養方法，其中，所述發酵罐培養還包括在發酵罐培養起始的48小時，進行分罐培養的步驟。

13.根據權利要求12所述的培養方法，其中，所述分罐培養為分為兩個或更多個發酵罐進行發酵罐培養。

14.根據權利要求1至5中任一權利要求所述的培養方法，其在發酵罐培養之前，還包括接種和種子擴大培養的步驟。

15.根據權利要求14所述的培養方法，其中，所述種子擴大培養包括一級種子擴大培養和二級種子擴大培養。

16.根據權利要求15所述的培養方法，其中，所述一級種子擴大培養包括下述步驟：

按照0.4％－1％的接種量將搖瓶種子液接入裝有滅菌后培養基的一級種子罐中，培養溫度25－32℃，通氣量1－2vvm，罐壓0.02－0.05MPa，培養30－35h，完成一級種子擴大培養。