[發明專利]K亞群禽白血病病毒熒光定量RT?PCR檢測引物組及試劑盒在審
| 申請號： | 201710093589.8 | 申請日： | 2017-02-21 |
| 公開（公告）號： | CN106755596A | 公開（公告）日： | 2017-05-31 |
| 發明（設計）人： | 楊素;陳軒;蘇惠龍;邵建宏;黃海超;趙福振;沙才華;趙海燕 | 申請（專利權）人： | 珠海出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 廣州嘉權專利商標事務所有限公司44205 | 代理人： | 胡輝,鄭瑩 |
| 地址： | 519015 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 亞群禽 白血病病毒 熒光 定量 rt pcr 檢測 引物 試劑盒 | ||
1.種用于K亞群禽白血病病毒熒光定量RT-PCR檢測的引物對及探針，其特征在于，所述引物對和探針是根據K亞群禽白血病病毒序列進行設計的。
2.根據權利要求1所述的用于K亞群禽白血病病毒熒光定量RT-PCR檢測的引物對及探針，其特征在于，所述引物對和探針是根據K亞群禽白血病病毒序列的gp85區段進行設計的。
3.根據權利要求2所述的用于K亞群禽白血病病毒熒光定量RT-PCR檢測的引物對及探針，其特征在于，所述引物對和探針的核苷酸序列如下所示：
ALV-F：5’-CCCCTGCTATTTAGGCAAGCT-3’，
ALV-R：5’-AGTTGGCAAGCACCTTGAGAA-3’，
ALV-Pb：5’-CCATGTTAGCACCCAACCACACAGAA-3’。
4.一種用于K亞群禽白血病病毒熒光定量RT-PCR檢測的試劑盒，其含有權利要求1-3任一項所述的引物對及探針。
5.一種用于K亞群禽白血病病毒熒光定量RT-PCR檢測的方法，包括如下步驟：
（1）提取樣品中病毒RNA；
（2）利用權利要求1-3任一項所述的引物對和探針對提取的病毒RNA進行RT-PCR擴增；
（3）收集熒光信號，對比標準曲線，計算得到病毒拷貝數。
6.根據權利要求5所述的用于K亞群禽白血病病毒熒光定量RT-PCR檢測的方法，其特征在于，RT-PCR擴增反應的條件為：42℃ 5min，95℃ 0.1min，95℃ 0.05min，60℃ 0.34min，共40個循環。
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