[發明專利]一種DNA序列及其應用

有效

• 申請號: 201710092923.8
• 申請日: 2017-02-21
• 公開（公告）號: CN106834309B
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發明（設計）人: 李宏業;李達偉;楊維東;劉潔生
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/79;C12N1/13;C12P7/64;C12R1/89
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

本發明涉及基因工程領域，特別涉及一種DNA序列及其應用。本發明公開了一種DNA序列，所述序列編碼BZIP轉錄因子，所述轉錄因子含有FBPcase結構域和BZIP結構域，BZIP轉錄因子可以上調TAG(三酰甘油)和脂肪酸合成途徑中多個關鍵基因和下調細胞壁合成相關的基因，因此，本發明可以應用于微藻型生物產油領域上并且具有良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及基因工程領域，特別涉及一種DNA序列及其應用。

背景技術

許多微藻種類含有豐富的蛋白質、脂類及各種維生素等營養成分，已廣泛用于營養保健、餌料等。不同種類微藻的油脂含量及脂肪酸組成區別較大，微藻被視為規模開發生物油脂及EPA、DHA等多不飽和脂肪酸產品的重要來源。另外，富含脂質的微藻也被認為是極具前景的生物柴油生產新原料。石油資源日趨枯竭，急需開發清潔、可再生的能源，微藻生產生物柴油具有生長速度快、產油量高等諸多優勢而被人們關注。

已有研究發現，通過氮脅迫、磷脅迫可以促進微藻油脂合成，但是，這會影響微藻的生長，降低其生物量。所以，必須尋找一個更好的手段去改良微藻的產油性狀?；蚬こ淌且粋€很好的手段，在已有研究指出通過脂肪酸合成途徑的單個關鍵基因進行基因工程改造，獲得相對優良的產油藻株。但是，對微藻脂肪酸合成途徑中單個關鍵基因的進行改造，所取得的效果也是有限的。針對這個問題，也有研究人員對其多個基因同時進行超量表達，以獲得更高的產油性狀，但是，這個操作過程非常耗時間，而且很繁瑣。

同時，制約微藻型生物柴油發展的一個因素是微藻的細胞壁很厚，提取胞內油脂需要去除微藻的細胞壁，這個環節會提高生產的成本，同時也會造成細胞的死亡，這對于工業應用來說是很不利的。雖然某些非細胞破壞的提油方法已經成功，但還是不能滿足微藻工業產油的需求。因此，我們需要去尋找一株既能高產油又能進行油脂胞外分泌的微藻。

轉錄因子是一類能夠同時調控多個基因的蛋白，其在基因表達調控中扮演著“管理員”的角色，因此，我們只需要對微藻中的一個轉錄因子進行基因改造，就可以達到同時改造多個基因的效果，獲得一個更加優良的品種。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種DNA序列及其應用。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明公開了一種DNA序列，其特征在于，所述DNA編碼BZIP轉錄因子；所述BZIP轉錄因子包括FBPcase結構域和BZIP結構域。

作為優選，所述DNA序列為其具有(Ⅰ)、(Ⅱ)所示的核苷酸序列中任意一個：

(Ⅰ)如DNA序列SEQ ID NO.1所示；或

(Ⅱ)經修飾、取代、缺失或添加一個或幾個核苷酸獲得的具有至少72％同源性的序列；

作為優選，所述取代的核苷酸數目為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42個。

作為優選，所述DNA序列編碼的BZIP轉錄因子正調控Acyl-CoA-binding proteins基因，3-Ketoacyl-ACP synthase基因，Long chain acyl-CoA synthetases基因,Lysophospholipid acyltransferase基因中的一個或多個基因的表達，同時負調控Anionic cell wall polymer biosynthesis enzyme基因的表達。

作為優選，所述DNA序列在提高三酰甘油合成、脂肪酸合成和促進脂質向胞外分泌中的應用。

本發明提供了一種表達載體，所述表達載體含有所述DNA序列。