[發明專利]一種制備抗高糖基化人絨毛膜促性腺激素抗體的方法在審
| 申請號： | 201710091917.0 | 申請日： | 2017-02-21 |
| 公開（公告）號： | CN106589123A | 公開（公告）日： | 2017-04-26 |
| 發明（設計）人： | 辛化偉;王瓊;程小玲 | 申請（專利權）人： | 武漢科技大學 |
| 主分類號： | C07K16/26 | 分類號： | C07K16/26;C07K16/06 |
| 代理公司： | 武漢今天智匯專利代理事務所(普通合伙)42228 | 代理人： | 鄧寅杰 |
| 地址： | 430000 湖北省*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 制備 抗高糖基化人 絨毛 促性腺激素 抗體 方法 | ||
1.一種制備抗高糖基化人絨毛膜促性腺激素抗體的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：
a．獲得能夠分泌高糖基化人絨毛膜促性腺激素的人腫瘤細胞的步驟；
b．將所述人腫瘤細胞或所述人腫瘤細胞的裂解物接種到非人哺乳動物的步驟；
c．從所述哺乳動物回收抗高糖基化人絨毛膜促性腺激素抗體或抗高糖基化人絨毛膜促性腺激素抗體產生細胞的步驟。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟a具體為：篩選人絨毛膜癌細胞。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟a具體為：將攜帶有編碼人絨毛膜促性腺激素多肽的核酸的哺乳動物表達載體導入至人腫瘤細胞中。
4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述人絨毛膜癌細胞選自人絨毛膜癌細胞系BeWo細胞、JEG-3細胞、JAR細胞、iC3-1細胞、ACH-3P細胞或HRT8/SVneo細胞。
5.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述編碼人絨毛膜促性腺激素多肽的核酸包括人絨毛膜促性腺激素α亞基、人絨毛膜促性腺激素β亞基和N端信號肽編碼序列；或者
所述編碼人絨毛膜促性腺激素多肽的核酸包括人絨毛膜促性腺激素β亞基和N端信號肽編碼序列；或者
所述編碼人絨毛膜促性腺激素多肽的核酸包括人絨毛膜促性腺激素α亞基和N端信號肽編碼序列。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述編碼人絨毛膜促性腺激素多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO:2所示。
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟b中接種哺乳動物為小鼠、大鼠、豚鼠、兔、羊、牛或駱駝。
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟b中，接種次數為四次，第二次接種在第一次接種后1～3周內進行，第三次接種在第一次接種后4周進行，第四次接種在第一次接種后第6周或第8周進行。
9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟c中，取哺乳動物全血并于血清中分離抗高糖基化人絨毛膜促性腺激素抗體。
10.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟c中，取哺乳動物脾臟并分離免疫細胞。
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