[發明專利]小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗及其生產方法

有效

• 申請號: 201710091863.8
• 申請日: 2017-02-21
• 公開（公告）號: CN106822888B
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發明（設計）人: 支海兵;薛青紅;印春生
• 申請（專利權）人: 中國獸醫藥品監察所
• 主分類號: A61K39/155
• 分類號: A61K39/155;A61K39/275;A61K39/295;A61K9/19;A61K47/42;A61K47/26;A61K47/02;A61P31/14;A61P31/20
• 代理公司: 北京君智知識產權代理事務所(普通合伙) 11305
• 代理人: 鄭明

本發明涉及一種小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗及其制備方法。本發明采用小反芻獸疫病毒PPRV 75/1?Clone 9株(CGMCC No.13388)和山羊痘病毒溫度敏感弱毒株(CVCC No.AV41)作為疫苗生產毒株分別在Vero細胞和山羊腎原代(次代)細胞培養收獲的病毒液混合后加入凍干保護劑經真空冷凍干燥制備成有效地預防小反芻獸疫和山羊痘的二聯活疫苗。

技術領域

本發明涉及一種小反芻獸疫、山羊痘二聯活疫苗及其生產方法。屬于獸用生物制品領域。

背景技術

小反芻獸疫和山羊痘是山羊的兩種傳染性疫病。

小反芻獸疫(Peste des petits ruminants,PPR)也稱為小反芻獸偽牛瘟、卡他、肺腸炎以及口肺腸炎綜合癥，是由小反芻獸疫病毒(Peste des petits ruminants,PPRV)引起的小反芻獸一種急性傳染病。聯合國糧農組織(FAO)和國際獸醫局(OIE)都將此病列為A類烈性傳染病，在我國該病也被列為一類動物傳染病。

1942年，世界上首次在西非的科特迪瓦報道發生小反芻獸疫。隨后的幾年里，在尼日利亞、塞爾維亞和加納等非洲國家都報道發生此病。近幾年來，小反芻獸疫又有進一步蔓延發展的趨勢，并且流行形勢日益嚴峻。到目前為止，中非、東非、西亞以及南亞的許多國家都報道發生過小反芻獸疫。世界各國對此病都予以高度重視，美國、韓國、印度等國家都在積極進行相關方面的研究工作。我國在2007年7月首次在西藏阿里地區報道發生小反芻獸疫，給我國的養羊業造成了重大的損失。

PPRV主要感染山羊和綿羊等小反芻獸，但是不同品種的羊敏感性有顯著差別。山羊比綿羊更易感，其中歐洲品系的山羊更為易感。幼齡動物易感性較高，但是哺乳期的動物抵抗力較強。PPR一般多發生在雨季以及干燥寒冷的季節。山羊的發病率可以達到100％，死亡率在20％-90％不等，嚴重爆發時死亡率也能夠達到100％。耐過動物經過一段時間可以恢復健康。

研究表明，山羊在感染PPRV后的四年時仍能夠檢測到抗體。防制PPR的主要措施就是進行疫苗免疫接種。由于PPRV和牛瘟病毒(Rinderpest virus，RPV)之間的抗原相關性很強，可用RPV組織培養的牛瘟活疫苗對綿羊、山羊進行免疫，并獲得了很好的免疫保護效果，但是這種疫苗不利于在全球牛瘟消滅計劃的實施，主要在非洲一些少數國家和地區有所使用。目前OIE在發生小反芻獸疫的國家和地區推薦使用的疫苗是PPRV 75/1株的生產的弱毒活疫苗。有研究人員還利用基因反向遺傳技術研究成功PPRV/RPV的嵌合體疫苗，即利用PPRV的糖蛋白基因取代RPV表面的相應糖蛋白基因。利用這種方法構建的疫苗，對PPRV能夠產生良好的免疫原性。此外，G.Berhe等將小反芻獸疫的F基因克隆到山羊痘病毒中構建了基因重組疫苗，能夠抵抗小反芻獸疫強毒的感染，但是還沒有應用到臨床生產實踐中。

小反芻獸疫活疫苗是由1975年從尼日利亞分離到的PPRV 75/1株病毒接種Vero細胞并連續傳代達70代以后致弱獲得的疫苗毒株。目前OIE參考實驗室已經傳代至120代，病毒仍然保持一定的免疫保護力。毒株在細胞上繁殖以后以凍干的形式－20℃條件下保存。

山羊痘(Goat pox)是由山羊痘病毒(Goat pox virus)引起的山羊的一種高度接觸性傳染病。臨床特征與綿羊痘相似。主要表現為皮膚和粘膜上出現皰疹，進而形成痘腫，并漸進發展為化膿，結痂和引起全身痘及全身性反應。但臨床上也有痘腫不經化膿過程的，即所謂“石痘”。重癥患羊多出現內臟器官病變和死亡。本病在地中海地區，非洲、和亞洲的一些國家，以及中、近東一帶均有發生。也偶見歐洲部分地區和澳大利亞。呈散發或地方性流行。其病狀和死亡率，因毒株及宿主不同而有差異。有報告稱土耳其的死亡率為3％～40％(Chefik)；摩洛哥的死亡率為5％～70％(Grimpret)等。