[發(fā)明專利]一種同時負(fù)載納米銀和姜黃素的納米抗菌劑及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710091773.9
• 申請日: 2017-02-21
• 公開（公告）號: CN106880593B
• 公開（公告）日: 2020-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉鑒峰;黃帆;劉金劍;張玉民;高陽;褚麗萍;楊麗軍;任春華
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號: A61K9/107
• 分類號: A61K9/107;A61K47/34;A61K33/38;A61P31/04;A61K31/12
• 代理公司: 12207 天津市杰盈專利代理有限公司
• 代理人: 朱紅星

1.一種同時負(fù)載納米銀和姜黃素的納米抗菌劑，其特征在于： 它是以兩親性嵌段共聚物聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸在水溶液中自組裝形成聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸聚合物膠束PM，利用親水性殼層中聚天冬氨酸的負(fù)電性吸附帶正電的Ag⁺離子并通過還原劑將其原位還原成納米銀，再利用疏水性內(nèi)核聚環(huán)己內(nèi)酯包裹天然無毒的抗菌成分姜黃素，從而形成既攜帶納米銀又同時負(fù)載姜黃素的聚合物膠束PM-Ag-Cur；其中聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸聚合物膠束PM： 納米銀：姜黃素的重量份數(shù)比為10：1：2。

2.權(quán)利要求1所述同時負(fù)載納米銀和姜黃素的納米抗菌劑的制備方法，其特征在于步驟如下：

1）將5.0 mg聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸溶解于1 mL DMF中，再將此聚合物溶液在電磁攪拌下，逐滴緩慢加入到9 mL濃度為1 mM ，pH為7.4的磷酸鹽緩沖液中，然后將溶液在室溫下攪拌4 h使膠束穩(wěn)定，之后將溶液透析三天以完全除去體系中的DMF溶劑，得到聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸聚合物膠束PM；

2）將100 μL 5 mg/mL AgNO₃溶液在冰水浴攪拌下逐滴緩慢加入到聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸聚合物膠束PM，在黑暗環(huán)境下輕輕攪拌30 min后，快速加入100 μL 15 mg/mL 新鮮NaBH₄溶液，溶液迅速變色，繼續(xù)攪拌4 h，然后透析兩天得到PM-Ag溶液；

3）將1.0 mg姜黃素溶解于5 mL無水DMF中，并在磁力攪拌下逐滴加入到PM-Ag溶液中，在室溫下攪拌2 h后，將溶液透析兩天以除去體系中的DMF，最終得到同時負(fù)載納米銀和姜黃素的聚合物膠束PM-Ag-Cur。

3.權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸的制備步驟如下：

1）將濃度為1 mmol的0.16 g N-(叔丁氧羰基)乙醇胺和濃度為87.8 mmol的10.0 g ε-己內(nèi)酯，加入到干燥的50 mL茄形瓶中混合，然后用20 mL重蒸的甲苯溶解均勻，加入一滴質(zhì)量濃度為0.1%的Sn(Oct)₂；

2）液氮冷凍，抽真空，通氮氣，解凍，重復(fù)此過程三次，之后在氮氣保護(hù)下，于110℃的油浴中反應(yīng)12 h；

3）反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，加入冰乙醚沉淀，靜置使其沉淀完全，經(jīng)抽濾洗滌，真空干燥后得到白色固體聚環(huán)己內(nèi)酯-叔丁氧羰基保護(hù)的氨基；

4）將上述3）中所得的聚環(huán)己內(nèi)酯-叔丁氧羰基保護(hù)的氨基溶于三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶劑中，其體積比為1：1，然后在室溫下攪拌12 h，反應(yīng)結(jié)束后，用冰乙醚沉淀，在冰箱中靜置過夜，抽濾洗滌，干燥得白色固體；

5）將4）中白色固體在三乙胺和二氯甲烷的混合溶劑，其體積比為1：1中室溫攪拌12 h，再用冰乙醚沉淀，抽濾，放入真空干燥箱中干燥得到大分子引發(fā)劑聚環(huán)己內(nèi)酯-氨基；

6）將2.0 g上述5）中得到的聚環(huán)己內(nèi)酯-氨基0.2 mmol和2.5 g L-天冬氨酸芐酯-N-羧酸酐10 mmol加入到干燥的茄形瓶中，加入15 mL二氯甲烷將其溶解均勻，然后液氮冷凍，抽真空，通氮氣，解凍，重復(fù)三次，之后在氮氣保護(hù)下，于30℃的油浴中反應(yīng)24 h；

7）反應(yīng)完成后，加入適量的二氯甲烷稀釋并用十倍體積的冰乙醚沉淀，抽濾洗滌，真空干燥后得到白色固體聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸芐酯；

8）將1.0 g上述7）中得到的白色固體置于25 mL圓底燒瓶中，用10 mL三氟乙酸溶解，然后依次加入1 mL苯甲醚和1 mL三氟甲磺酸，在℃冰浴下攪拌2 h，之后用冰乙醚沉淀，抽濾洗滌，真空干燥得到嵌段共聚物聚環(huán)己內(nèi)酯-b-聚天冬氨酸。

4.權(quán)利要求1所述同時負(fù)載納米銀和姜黃素的納米抗菌劑在制備增強(qiáng)抗菌活性藥物方面的應(yīng)用；所述的增強(qiáng)抗菌活性指的對致病細(xì)菌有很好的協(xié)同殺滅效果。

5.權(quán)利要求1所述同時負(fù)載納米銀和姜黃素的納米抗菌劑在制備在提高對銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌協(xié)同抗菌藥物方面的應(yīng)用。