[發(fā)明專利]一種啟動(dòng)子以及重組酵母菌株

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710090101.6
• 申請(qǐng)日: 2017-02-20
• 公開（公告）號(hào): CN106893726B
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周曉;陳艷;王穎;肖文海;姚明東;李博;劉宏;元英進(jìn)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/113
• 分類號(hào): C12N15/113;C12N1/19;C12P5/00;C12P5/02;C12P7/04;C12P7/22;C12R1/865
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

1.一種啟動(dòng)子，其特征在于，在酵母菌株ALD6啟動(dòng)子全長序列基礎(chǔ)上，序列如SEQ IDNO:1所示，進(jìn)行如下一項(xiàng)或多項(xiàng)的處理：

（1）敲除一段或多段ALD6啟動(dòng)子上的保守序列；

（2）敲除一段或多段ALD6啟動(dòng)子上的包含保守序列的序列；

（3）對(duì)ALD6啟動(dòng)子上的846-900bp保守序列進(jìn)行堿基轉(zhuǎn)換突變；

（4）敲除一段或多段ALD6啟動(dòng)子上的包含保守序列的序列，對(duì)ALD6啟動(dòng)子上的846-900bp保守序列進(jìn)行堿基置換突變；

（5）置換一段或多段ALD6啟動(dòng)子上的保守序列；

（6）置換一段或多段ALD6啟動(dòng)子上的包含保守序列的序列；

所述保守序列選自ALD6啟動(dòng)子全長序列中1-377bp、630-654bp、701-787bp、846-900bp、916-925bp、941-1116bp、1184-1205bp、1227-1313bp、1430-1469bp九段保守序列；

所述包含保守序列的序列是在保守序列上游、下游或上下游位置連接相鄰的序列，選自1-629bp序列、630-700bp序列、701-845bp序列、846-915bp序列、916-940bp序列、941-1183bp序列、1184-1226bp序列、1227-1429bp序列、1430-1479bp序列、378-654bp序列、655-787bp序列、787-900bp序列、788-900bp序列、901-925bp序列、926-1116bp序列、1117-1205bp序列、1117-1191bp序列、1206-1313bp序列、1314-1469bp序列；

在對(duì)相關(guān)序列的置換處理中，可選擇不影響酵母菌株萜類化合物生產(chǎn)功能的序列進(jìn)行置換。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述啟動(dòng)子，其特征在于，在酵母菌株ALD6啟動(dòng)子全長序列基礎(chǔ)上，為進(jìn)行如下之一項(xiàng)處理后的啟動(dòng)子：

（1）敲除一段或多段ALD6啟動(dòng)子上的包含保守序列的序列；

（2）敲除一段ALD6啟動(dòng)子上的保守序列；

（3）采用抗性標(biāo)簽置換一段或多段ALD6啟動(dòng)子上的包含保守序列的序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述啟動(dòng)子，其特征在于，所述抗性標(biāo)簽為KanMX抗性標(biāo)簽。

4.權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述啟動(dòng)子在構(gòu)建萜類化合物生產(chǎn)用酵母菌株以及在生產(chǎn)萜類化合物中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述應(yīng)用，其特征在于，所述萜類化合物為香葉醇、青蒿二烯、香葉基香葉醇、酵母固醇、番茄紅素中的一種或多種。

6.一種重組的生產(chǎn)萜類化合物酵母菌株，其特征在于，采用權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述啟動(dòng)子替換原有ALD6啟動(dòng)子。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述酵母菌株，其特征在于，所述酵母菌株為釀酒酵母菌株。