[發明專利]一種選育甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系的方法

在審

• 申請號: 201710089901.6
• 申請日: 2017-02-20
• 公開（公告）號: CN106613920A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 張文學;趙興忠;李殿榮;李少欽;田建華;關周博
• 申請（專利權）人: 陜西省雜交油菜研究中心
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司11385
• 代理人: 董芙蓉

技術領域

本發明屬于育種方法技術領域，尤其涉及一種選育甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系的方法。

背景技術

在眾多的油菜雜種優勢利用的途徑和方法中，最常用也是最有效的利用途徑是以細胞質不育(CMS)、細胞核不育(GMS)、化學誘導不育(CHA)創制雜交種為代表。目前國內外已報道的油菜CMS約有20個，在生產中比較常用的主要有Polima CMS、陜2A CMS、蘿卜細胞質CMS(Ogu CMS)，前兩種在我國生產上已大面積推廣應用，Ogu CMS主要在歐美得到推廣應用，我國雖有相關的研究，但起步較晚，應用落后。

Ogu CMS是日本農學家Ogura于1968年在蘿卜種質資源中發現的不育材料，法國的Bannerot(1974)將歐洲甘藍型油菜細胞核導入日本蘿卜不育胞質中，經連續回交轉育育成甘藍型油菜Ogu CMS，該不育系不育性徹底且不受環境影響，結實性好，利用價值高，但其恢復源狹窄且在油菜中很難找到。1983年，法國的Pelletier等通過原生質體融合找到了恢復系，但是仍存在著恢復能力不夠理想，部分雌性不育，較高硫甙與恢復基因連鎖等問題；2005年Primard-Brisset等利用伽馬射線輻射誘變使DNA片段重組，獲得了低硫苷的甘藍型油菜Ogu CMS恢復系R2000，使Ogu CMS雜交油菜在歐洲廣泛運用；2005年先正達公司發現，Ogu蘿卜的恢復基因座與芥子油基因座之間發生斷裂并重新連接的BLR1重組現象，并通過具備該現象的BLR-038與甘藍型油菜不育系雜交，從后代中選育出農藝性狀良好的低硫苷恢復系BLR-038(專利：200580003519.4)；美國先鋒公司也在2009年通過輻射誘變技術選育了具有縮短Raphanus片段的新蕓薹屬Ogu恢復系SRF，(專利：200980109801.9)。國內，李旭峰等(2001)利用染色體工程將Ogu CMS恢復基因從蘿卜的變種材料藍花子中導入到甘藍型油菜中，但是存在附加染色體的影響；陳衛江等(2013)以蘿卜-甘藍為供體材料，選育出Ogu CMS的恢復系CLR650，其導人的蘿卜片段長度比國外同類恢復材料R113短，但硫苷含量較高；文雁成(2010,2016)、王俊生(2011)、劉絢霞(2013)、楊其東(2016)等從恢復系的選育應用方面作了研究，利用分子標記輔助選擇獲得了改良的甘藍型Ogu CMS恢復材料R2008(文雁成)、S2572(楊其東)等。

上述國內外所見研究，均是以Ogu CMS的恢復系創制或者以選育改良為目標的，不涉及同時配套改良保持系和不育系。為了加快我國甘藍型油菜Ogu CMS研究和應用，不僅需要更多的Ogu CMS恢復系材料，更需要創造與甘藍型油菜Ogu CMS配套的三系育種材料。本發明就是從這點出發的。其目標在于創造一種快速選育甘藍型油菜Ogu CMS三系的簡便方法。

發明內容

本發明目的在于提供一種選育甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系的方法，旨在解決目前甘藍型油菜Ogu CMS三系品質性狀和農藝性狀較差，不同遺傳背景的恢復系少，配套的穩定三系缺乏，雜交種測配和應用存在一定困難等問題。

本發明是這樣實現的，一種選育甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系的方法，是利用遺傳原理，將育性標記和回交選育相結合，兼顧農藝性狀、品質性狀選擇，把甘藍型油菜Ogu CMS的恢復基因定向導入優良甘藍型油菜親本中，選育甘藍型油菜蘿卜細胞質不育恢復系，同時獲得新的甘藍型油菜Ogu CMS和保持系。

進一步，選育甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系的方法具體包括：

以甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育雜種或Ogu不育系×其恢復系F₁為母本，用優良的品種(系)為輪回父本雜交，在各品系測配后代中繼續選擇可育株與輪回父本回交，每個世代通過田間觀察記載，進行農藝性狀篩選；在室內再通過化驗分析，進行含油量、硫苷和脂肪酸組分的品質性狀篩選；

連續回交5～6代，至父母本性狀基本穩定一致時，對回交世代可育株自交，后代育性不發生分離即為新的甘藍型油菜Ogu CMS的恢復系；

對回交世代分離出的不育株與輪回父本測交即得到新的甘藍型油菜OguCMS，輪回父本即為甘藍型油菜Ogu CMS的保持系。

進一步，所述一種選育甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育三系的方法，其特征在于，以甘藍型油菜蘿卜細胞質雄性不育雜種為母本，以優良甘藍型油菜品種系作為輪回父本，通過一次雜交和多次回交，選育得到配套的雄性不育“三系”，即不育系、保持系和恢復系。