[發明專利]一種防己茯苓湯組合物的質量控制方法

有效

• 申請號: 201710087147.2
• 申請日: 2017-02-17
• 公開（公告）號: CN108459129B
• 公開（公告）日: 2020-06-05
• 發明（設計）人: 劉志剛;張超;林麗娜;陳周全;譚沛;馬鵬崗;石子儀;高云佳;屠鵬飛
• 申請（專利權）人: 華潤三九醫藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/90
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 曹治麗

1.防己茯苓湯組合物的檢測方法，其特征在于，包括采用高效液相色譜法建立防己茯苓湯組合物指紋圖譜，色譜條件為：

色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；

流速：0.8ml/min～1.2ml/min；柱溫：20℃～35℃；

檢測儀器采用紫外檢測器，指紋圖譜的檢測波長237nm；

理論塔板數以甘草酸峰計算不低于5000；

參照物溶液為甘草酸溶液；

以乙腈為流動相A，以0.2％磷酸+0.2％三乙胺溶液為流動相B，按如下順序進行梯度洗脫：

還包括采用薄層色譜法鑒別防己茯苓湯組合物中的防己、甘草、黃芪、桂枝，鑒別方法如下：

(1)鑒別防己：取防己茯苓湯組合物2g～4g研細，加氨試液30ml～60ml，超聲10min～30min，濾過，濾液加60ml～120ml水飽和正丁醇萃取，分取正丁醇層，減壓蒸干，以甲醇1ml～5ml溶解，濾過，即得供試品溶液；

取防己對照藥材0.2g～1g研細，加氨試液30ml～60ml，超聲10min～30min，濾過，濾液加60ml～120ml水飽和正丁醇萃取，分取正丁醇層，減壓蒸干，以甲醇1ml～5ml溶解，濾過，即得防己對照藥材溶液；

取粉防己堿對照品、防己諾林堿對照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg～2mg的混合溶液，作為對照品溶液；

鑒別方法：吸取供試品溶液，防己對照藥材溶液，以及對照品溶液各4μl～8μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-丙酮-甲醇-5％濃氨試液為展開劑，于濕度低于70％環境下展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，其中，所述二氯甲烷-丙酮-甲醇-5％濃氨試液的體積比為3～12：0.5～2：0.5～2：0.05～0.2；

(2)鑒別甘草、黃芪：取防己茯苓湯組合物研細，稱取1g～5g，加甲醇25ml～75ml超聲20min～40min，濾過，濾液減壓蒸干，殘渣先后加氨試液、水并超聲助溶，再通過內徑為1.5cm柱高為15cm的D101型大孔吸附樹脂柱，先后以水，30％～50％乙醇，70％～90％乙醇洗脫，收集70％～90％乙醇洗脫的洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml-5ml使溶解，作為供試品溶液；

取甘草對照藥材0.2g～0.8g、黃芪對照藥材1g～4g，研細，分別加甲醇超聲，濾過，濾液減壓蒸干，殘渣先后加氨試液、水并超聲助溶，再通過D101型大孔吸附樹脂柱，先后以水，30％～50％乙醇，70％～90％乙醇洗脫，收集70％～90％乙醇洗脫的洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1ml-5ml使溶解，分別制得甘草對照藥材溶液、黃芪對照藥材溶液；

取黃芪甲苷、甘草苷、甘草酸銨對照品適量，加甲醇制成每1ml各含0.3mg～0.8mg的混合溶液，作為對照品溶液；

鑒別方法：吸取供試品溶液、甘草對照藥材溶液、黃芪對照藥材溶液及對照品溶液各5μl～9μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，使呈條帶狀；以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm下檢視，再噴以5％～10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置于365nm的紫外光燈下檢視，其中，所述乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水的體積比為7.5～30：0.5～2：0.5～2：1～4；

(3)桂枝鑒別：取防己茯苓湯組合物研細，稱取1g～5g，加乙醇10ml～30ml超聲20min～50min，濾過，作為供試品溶液；

取桂枝對照藥材0.2g～1g研細，加乙醇10ml～30ml超聲20min～50min，濾過，制得對照藥材溶液；

取肉桂酸對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.1mg～0.5mg的溶液，作為對照品溶液；

鑒別方法：分別吸取供試品溶液、對照藥材溶液以及對照品溶液5μl～12μl，分別點于同硅膠GF254薄層板上；以環己烷-乙酸乙酯-冰乙酸為展開劑，展開，取出，晾干，置254nm下檢視，其中，所述環己烷-乙酸乙酯-冰乙酸的體積比為2～8：0.5～2：0.025～0.1。