[發明專利]基于胞內甜菜堿積累的疫苗制備方法及制劑

有效

• 申請號: 201710084014.X
• 申請日: 2017-02-16
• 公開（公告）號: CN108434105B
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發明（設計）人: 馬悅;王啟要;劉曉紅;張元興
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: A61K9/19
• 分類號: A61K9/19;A61K47/18;A61K47/26;A61K47/02;A61K39/02;C12N1/20;C12R1/63
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種制備活細胞疫苗凍干制劑的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1) 培養海洋弧菌活細胞，其是具有免疫原性且能自體合成或轉運甜菜堿的原核細胞；培養時添加3～10mM甜菜堿，使得活細胞的胞內合成或轉運積累甜菜堿；培養時還添加1.5～4%氯化鈉；

(2) 收集經過步驟(1)培養的海洋弧菌活細胞，與基礎配體系統混合，進行凍干，獲得活細胞疫苗凍干制劑；所述的基礎配體系統包括：海藻糖2～5%w/v；甘氨酸1～5%w/v；NaCl0.8～1.5%w/v；且包含甜菜堿3～8mM；

所述的海洋弧菌選自：鰻弧菌，哈氏弧菌，溶藻弧菌。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，氯化鈉的濃度是2～3.5%。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，進行凍干時，將步驟(1)獲得的活細胞與基礎配體系統混合，凍干；所述的基礎配體系統包括：

海藻糖 3～4%w/v；

甘氨酸 2～4%w/v；

NaCl 0.9～1.2%w/v。

4. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，進行凍干時，步驟(1)獲得的活細胞與基礎配體系統混合時，活細胞密度不低于5×10⁹ CFU/ml。

5. 如權利要求4所述的方法，其特征在于，活細胞密度不低于10¹⁰ CFU/ml。

6. 一種活細胞疫苗凍干制劑，其特征在于，該凍干制劑包括：

海洋弧菌活細胞，所述的活細胞是胞內積累有甜菜堿的，其通過以下方法獲得：培養海洋弧菌活細胞，其是具有免疫原性且能自體合成或轉運甜菜堿的原核細胞；培養時添加3～10mM甜菜堿，使得活細胞的胞內合成或轉運積累甜菜堿；培養時還添加1.5～4%氯化鈉；和

基礎配體系統；所述的基礎配體系統包括：海藻糖2～5%w/v；甘氨酸1～5%w/v；NaCl0.8～1.5%w/v；

所述的海洋弧菌選自：鰻弧菌，哈氏弧菌，溶藻弧菌。

7.如權利要求6所述的活細胞疫苗凍干制劑，其特征在于，所述的基礎配體系統包括：

海藻糖 3～4%w/v；

甘氨酸 2～4%w/v；

NaCl 0.9～1.2%w/v。