[發明專利]一種半乳糖凝集素?3結合蛋白的檢測試劑盒及其方法和應用

在審

• 申請號: 201710083824.3
• 申請日: 2017-02-16
• 公開（公告）號: CN106771258A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 湯郡;葛晨晨;陳穎
• 申請（專利權）人: 廣州賽太特生物醫學科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 張春水,唐京橋

技術領域

本發明屬于醫學免疫學與體外診斷技術領域，具體涉及一種半乳糖凝集素-3結合蛋白的檢測試劑盒及其方法和應用。

背景技術

肺癌是全世界發病率和病死率最高的惡性腫瘤，好發年齡為45歲-80歲。我國每年約有40萬例患者死于肺癌，發病人數呈逐年上升趨勢，嚴重危害大眾健康。肺癌早期多無癥狀或癥狀很輕微，不足以引起病人的重視，錯過了早期肺癌的診斷機會。當病人出現咳嗽、胸痛、咯血癥狀來醫院看病時，80％已是晚期。早期肺癌經過手術以及綜合治療，5年存活率可達60％-90％；而晚期肺癌患者大部分在6個月以內死亡。所以，早期篩查診斷、及時治療是目前降低肺癌患者死亡率，提高長期生存率的首要途徑。

臨床常用診斷肺癌的方法包括：胸部X光片、低劑量螺旋CT、支氣管內鏡、病理組織活檢等。然而，這些方法具有以下缺點：檢測靈敏度和特異性不高，很難發現早期病人；早期穿刺活檢易漏診；有創性、很難被大眾普遍接受；價格昂貴。而臨床急需的肺癌早期篩查診斷方法應具備的特點為：無創或微創、操作簡單、快速、高靈敏度與高特異性。

半乳糖凝集素-3結合蛋白(Galectin-3-binding Protein，G3BP)又叫做Mac-2BP或90K，是一種分泌型糖蛋白，主要存在于細胞外基質和血清中。目前相關研究表明，人類G3BP在免疫組織和細胞中表達，并且在病毒感染以及某些癌癥病人血清中表達上調，與腫瘤的發生、轉移和患者的5年生存率降低密切相關。但是迄今為止，還沒有關于G3BP蛋白作為血清標志物在肺癌早期篩查或診斷中應用的相關報道。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種半乳糖凝集素-3結合蛋白的檢測試劑盒及其方法，應用于制備肺癌早期篩查或診斷試劑和/或藥物。

本發明的具體實施方案如下：

本發明提供了一種半乳糖凝集素-3結合蛋白的檢測試劑盒，包括：半乳糖凝集素-3結合蛋白單克隆抗體包被的微孔板、半乳糖凝集素-3結合蛋白多克隆抗體工作液和辣根過氧化物酶標記的羊抗兔免疫球蛋白G。

優選的，所述半乳糖凝集素-3結合蛋白單克隆抗體包被的微孔板的制備為：將濃度為3～5μg/mL的半乳糖凝集素-3結合蛋白單克隆抗體稀釋液包被所述微孔板。

優選的，所述半乳糖凝集素-3結合蛋白多克隆抗體工作液的工作濃度為1.5～3.5μg/mL。

優選的，所述檢測試劑盒中還包括：標準品溶液、質控品溶液和化學發光底物液。

優選的，所述化學發光底物液包含化學發光底物A液和化學發光底物B液；所述化學發光底物A液和化學發光底物B液的混合體積比為100:1。

優選的，所述標準品溶液為0～3000pg/mL的重組半乳糖凝集素-3結合蛋白溶液。

優選的，所述質控品溶液為10～2000pg/mL的重組半乳糖凝集素-3結合蛋白溶液。

本發明還提供了一種半乳糖凝集素-3結合蛋白的檢測方法，采用上述檢測試劑盒進行檢測。

本發明還提供了上述檢測試劑盒或上述檢測方法在制備肺癌早期篩查或診斷試劑和/或治療肺癌藥物中的應用。

與現有技術相比，本發明所提供的一種半乳糖凝集素-3結合蛋白的檢測試劑盒靈敏度高，特異性強，可快速定量檢測人血清中G3BP的含量；無創取樣，易于被大眾接受；而且，檢測成本低，操作步驟簡單，穩定性好，可作為一種臨床上肺癌早期篩查的輔助手段，對肺癌的早期篩查診斷和及時治療具有重要意義和實際應用價值。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據提供的附圖獲得其他的附圖。

圖1為標準品溶液和光子數的標準曲線；

圖2為ROC曲線；

圖3為健康志愿者于肺癌早期患者血清中G3BP的濃度；

圖4為檢測試劑盒的回收率測試結果。

具體實施方式

本發明提供了一種可快速準確地定量檢測人血清中半乳糖凝集素-3結合蛋白(G3BP)的檢測試劑盒，可作為一種用于肺癌早期篩查的輔助手段，應用于制備肺癌早期篩查診斷試劑和/或治療肺癌藥物，為肺癌早期篩查提供研究基礎，對肺癌的早期篩查診斷和及時治療具有重要意義和實際應用價值。