[發明專利]一種檢測液態生物檢材中氰化物的方法

有效

• 申請號: 201710081623.X
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN106841446B
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發明（設計）人: 喬正;向平;沈保華;嚴慧;卓先義
• 申請（專利權）人: 司法部司法鑒定科學技術研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 上海申新律師事務所 31272
• 代理人: 黨蕾

本發明提供了一種檢測液態生物檢材中氰化物的方法，包括以下步驟：(1)樣品前處理，即在室溫下，取液態生物檢材樣品與二氯甲烷內標液的混合溶液，置于頂空鉗口瓶中，再加入磷酸，立即用封蓋鉗加蓋密封；然后將頂空鉗口瓶置于恒溫電加熱器中加熱，最后，經頂空自動進樣器進樣至GC?MS系統；(2)頂空GC?MS分析。該方法具有優異的專屬性，線性相關性好，LOD、LOQ足夠低，即靈敏度較高，且精密度和準確度更好；該檢測方法所需樣品量少，操作簡單，檢測迅速，無需固相萃取、衍生化等復雜流程或工藝，合理運用氣相色譜與質譜聯用分析技術，定性、定量可靠度高，因此，適用于生物體內氰化物的簡便、快速定性和/或定量分析。

技術領域

本發明屬于化學檢測領域，具體涉及一種檢測液態生物檢材中氰化物的方法。

背景技術

氰化物特指帶有氰基(CN)的化合物，屬于劇毒性物質，其對人體毒性作用機理主要是由CN^-與細胞線粒體內高鐵細胞色素氧化酶結合，使酶的結構改變，生成氰化高鐵細胞色素氧化酶，導致其不能再從底物獲得電子，因而使之失去遞氧作用，整個生物氧化過程中斷，造成組織缺氧，最終使生物機體陷入內窒息狀態直至死亡。研究發現，口服氫氰酸致死量為0.7～3.5mg/kg，吸入的空氣中氫氰酸濃度達0.5mg/L即可致死；口服氰化鈉、氰化鉀的致死量為1～2mg/kg。此外，成人一次服用苦杏仁40～60粒、小兒10～20?？砂l生中毒乃至死亡；未經處理的木薯致死量為150～300g。并且，很多含氰化合物(如氰化鉀、氰化鈉和電鍍、照相染料所用藥物常含氰化物)都可引起急性中毒或致死。

通常，氰化物中毒的臨床表現為：大劑量中毒常發生閃電式昏迷和死亡；攝入后幾秒鐘即發出尖叫聲、發紺、全身痙攣，立即呼吸停止。小劑量中毒可以出現15至40分鐘的中毒過程：口腔及咽喉麻木感、流涎、頭痛、惡心、胸悶、呼吸加快加深、脈搏加快、心律不齊、瞳孔縮小、皮膚粘膜呈鮮紅色、抽搐、昏迷，最后意識喪失而死亡。

正是由于氰化物的應用廣泛，加之我國現有的法律法規對危險品的管控尚存在一定漏洞，例如由于互聯網銷售等流通環節，因意外、自殺、他殺等氰化物中毒案例時有發生，所以，現實案件中的體內檢測需求巨大。

然而，現有的氰化物檢測方法包括氣相色譜法、高效液相色譜法、光譜法、電化學法、硝酸銀滴定法及快速檢測試紙條法等，存在樣品用量多、費時且靈敏度低、不適用于生物樣本檢測等問題(邸玉敏，朱軍，常靖，肖楠；氰化物檢測方法研究進展.理化檢驗-化學分冊，2011,47(12):1491-1494)；尤其是，這些方法均未經質譜確認，特異性差，容易產生假陽性結果。另外，其中的部分方法還存在最低檢出限(LOD)、最低定量限(LOQ)不夠低，精密度和準確度不夠好的缺陷。

質譜法(Mass Spectrometry，MS)是一種用電場和磁場將運動的離子(帶電荷的原子、分子或分子碎片，有分子離子、同位素離子、碎片離子、重排離子、多電荷離子、亞穩離子、負離子和離子－分子相互作用產生的離子)按它們的質荷比分離后進行檢測的方法。質譜法，特別是它與色譜儀及計算機聯用的方法，已廣泛應用在有機化學、生化、藥物代謝、臨床、毒物學、農藥測定、環境保護、石油化學、地球化學、食品化學、植物化學、宇宙化學和國防化學等領域。用質譜儀器作多離子檢測，可用于定性分析，例如，在藥理生物學研究中能以藥物及其代謝產物在氣相色譜圖上的保留時間和相應質量碎片圖為基礎，確定藥物和代謝產物的存在；也可用于定量分析，用被檢化合物的穩定性同位素異構物作為內標，以取得更準確的結果。因此，質譜技術是臨床毒物學和法醫毒物學領域的金標準，建立基于質譜分析的方法有利于提供可靠的法庭證據。

特別是，血液是體內毒物分析的主要生物檢材，血液中毒(藥)物的含量可以有效地反映毒(藥)物作用強度和中毒程度。因此，快速有效又精準地對血液中氰化物成分的定性定量分析，可以為臨床急救、案(事)件的性質定性、偵破方向起著重要指導性意義。

發明內容