[發明專利]GINS2基因或蛋白的抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的應用

有效

• 申請號: 201710081454.X
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN106620703B
• 公開（公告）日: 2019-07-16
• 發明（設計）人: 夏偉;葉穎;倪晶;莊菊花;王國玉
• 申請（專利權）人: 上海市第七人民醫院
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K31/713;C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;A61P35/00;C12Q1/6886;G01N33/574;G01N33/573
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 周春洪

本發明涉及GINS2基因或蛋白的抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的應用。本發明設計了針對人GINS2基因的小分子干擾RNA序列，RNA干擾載體和RNA干擾慢病毒，進一步檢測了GINS2基因的沉默效率、GINS2?siRNA慢病毒對腫瘤細胞增殖能力和凋亡水平的影響，結果顯示采用RNAi方法下調人GINS2基因的表達后可有效抑制腫瘤細胞的增殖和生長并促進其凋亡，表明GINS2基因是原癌基因，可作為腫瘤治療的靶點，通過RNAi方式沉默GINS2基因的表達可作為抑制腫瘤發展的有效手段，本發明構建的siRNA、RNA干擾載體和RNA干擾慢病毒可用于制備高效的抗腫瘤藥物。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，具體地說，涉及GINS2基因或蛋白的抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

隨著人類生活習慣和行為模式的改變，以及農工業發展過程帶來的環境污染和人口老齡化等原因，惡性腫瘤成為人類致死的主要疾病。世界衛生組織國際癌癥研究中心(IARC/WHO)的最新數據顯示惡性腫瘤在全球的發病率呈上升趨勢，2008年760萬人死于惡性腫瘤，其中64％發生在發展中國家。在我國，腫瘤防治面臨的形勢也極為嚴峻，最新報告顯示，在過去30年間，我國惡性腫瘤的發病率和死亡率均呈明顯上升趨勢；據預測，在未來20-30年間，我國惡性腫瘤發病率和死亡率不斷上升的趨勢將繼續維持。因此，對腫瘤的研究是生命科學和醫學領域的持續研究熱點之一。

惡性腫瘤傳統療法如放療、化療和手術治療的局限性促使人們尋找新的抗腫瘤方法。隨著對腫瘤發生發展分子機制認識的深入，人們已意識到腫瘤是一種基因病，糾正發生缺陷的基因可為腫瘤的治療提供新的希望。近年來發展了許多針對腫瘤的基因治療方法的研究，但迄今為止進入臨床應用的幾種基因藥物的臨床療效有限，且具有潛在的、長期的、延遲的副作用，因此，尋求治療的新靶點和開發新的基因治療方法已成為國內外腫瘤基因治療的研究方向。

RNA干擾(RNA interference，RNAi)是一門基因阻斷技術，為一種雙鏈RNA(double-stranded RNA，dsRNA)分子在mRNA水平上阻斷特異基因的表達或使其沉默的過程，即序列特異性的轉錄后基因沉默(Post-transcriptional gene silencing，PTGS)。近年來，RNAi已成為腫瘤基因治療的有效策略。利用RNAi技術可以抑制原癌基因、突變的抑癌基因、細胞周期相關基因、抗凋亡相關基因等表達來抑制腫瘤的發生和發展。

GINS2是DNA復制復合體GINS家族成員之一，位于人染色體16q24上，其mRNA長度為1196bp，編碼相對分子質量為21000的蛋白質。GINS是一種復制解旋酶，在移動到復制叉前打開DNA雙鏈。研究表明，GINS家族成員在癌癥的發生中起一定作用，如GINS家族成員在侵襲性黑色素瘤中過表達，也有文獻表明，DNA復制相關蛋白在不同細胞中有不同的作用，如在決定中心體復制數量和疾病發生的不同階段方面，GINS均發揮了一定功能，特別是與染色體的分離密切相關。

而目前關于GINS2在腫瘤相關領域的報道很少。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的不足，提供GINS2基因或蛋白的抑制劑的新用途。

本發明提供了GINS2基因或蛋白的抑制劑在制備抗腫瘤藥物中的應用。

作為一種具體實施方式，所述的抑制劑選自以GINS2蛋白或其轉錄本為靶序列、且能夠抑制GINS2蛋白表達或基因轉錄的siRNA、dsRNA、shRNA、miRNA、反義核酸；或能表達或形成所述siRNA、dsRNA、miRNA、反義核酸的構建物。

作為一個優選例，所述的抑制劑選自下列中的一種：

a)siRNA，所述siRNA的靶序列如SEQ ID NO.1所示；

b)shRNA，所述shRNA的編碼序列正義鏈如SEQ ID NO.5所示，反義鏈如SEQ IDNO.6所示；