[發(fā)明專利]一種ACPA陰性的RA診斷標(biāo)志物及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710081290.0
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN106950365B
• 公開（公告）日: 2018-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張烜;莫文秀;李永哲;胡朝軍;劉國振;武麗君
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院;北京衡定聯(lián)合生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/564
• 分類號: G01N33/564;G01N33/68
• 代理公司: 北京智為時代知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11498
• 代理人: 王加嶺;楊靜

本發(fā)明提供脫氧輔蛋白雙加氧酶，即DOHH或其片段在制備用于診斷抗瓜氨酸多肽抗體陰性的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎疾病的試劑中的用途。本發(fā)明通過高密度蛋白質(zhì)芯片與RA血清雜交篩選到35種蛋白質(zhì)為候選ACPA陰性RA自身抗原，鑒定到4種蛋白質(zhì)抗原在RA的ACPA陰性的血清中具有較高的靈敏度和特異度，均為新發(fā)現(xiàn)的自身抗原，它們是DOHH,DUSP11,PTX3,PAGE5，表明DOHH,DUSP11,PTX3,PAGE5可作為ACPA陰性的RA診斷標(biāo)志物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物檢測領(lǐng)域，具體涉及一種ACPA陰性的RA診斷標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一種慢性的自身免疫性疾病，主要是以引起全身多處小關(guān)節(jié)局部滑膜的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而造成關(guān)節(jié)局部的骨質(zhì)破壞為一組臨床表現(xiàn)的疾病。在發(fā)展中國家，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎影響了近0.5％-1％左右的人群。總體來說，RA在女性中的發(fā)病率要高于男性，在老年人中的發(fā)病率要高于年輕人。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的臨床表現(xiàn)差異很大，可以是輕微癥狀的自限性疾病，也可以是快速進(jìn)展的炎癥伴關(guān)節(jié)破壞及嚴(yán)重身體殘疾。由于疾病表現(xiàn)的差異性，人們制定了分類標(biāo)準(zhǔn)作為疾病定義、標(biāo)準(zhǔn)化臨床試驗(yàn)入選人群選擇以及多中心研究比較的基礎(chǔ)。因此1987誕生了由年美國風(fēng)濕病學(xué)會(ACR)制定的RA的分類標(biāo)準(zhǔn)。但在實(shí)際應(yīng)用過程中，由于該分類標(biāo)準(zhǔn)對于關(guān)節(jié)炎的定義要求嚴(yán)格，致使它對于RA診斷的敏感性不高，有相當(dāng)一部分早期的RA并沒有從中被識別出來。但同時，尤為重要的是新發(fā)RA病例有可能從早期的有效干預(yù)中獲益，以避免進(jìn)展為慢性、侵蝕狀態(tài)RA，進(jìn)一步導(dǎo)致殘疾，影響長期生活質(zhì)量，增加疾病死亡率。因此，對于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎來說，早期的診斷和治療是阻止不可逆性關(guān)節(jié)破壞的關(guān)鍵。于是2009年，ACR/EULAR標(biāo)準(zhǔn)更新，該標(biāo)準(zhǔn)診斷RA的敏感性較高，能夠在疾病早期診斷RA并進(jìn)行治療，缺點(diǎn)是特異性較差。

在2009年最新的RA的分類標(biāo)準(zhǔn)中，血清中ACPA(抗瓜氨酸多肽抗體)的陽性被納入診斷標(biāo)準(zhǔn)。這一抗瓜氨酸化的蛋白抗體被認(rèn)為是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的血清特異性的標(biāo)志物，它的出現(xiàn)也增加了我們對RA發(fā)病機(jī)制的理解。但是直至現(xiàn)在，RA的確切病因仍然未知，環(huán)境因素和遺傳因素被公認(rèn)為是引起RA臨床癥狀的“扳機(jī)”。同時，臨床上也存在著一類ACPA抗體陰性的RA患者，并且隨著研究者對疾病的認(rèn)識不斷加深，他們逐漸認(rèn)識到ACPA抗體陽性的RA患者和ACPA抗體陰性的RA患者存在一定的臨床異質(zhì)性。但是由于目前臨床上對于ACPA抗體陰性的RA患者缺乏特異性的生物標(biāo)志物，這使得這類患者的診斷難度大大增加。

RA患者的血清中發(fā)現(xiàn)自身抗體已經(jīng)超過70年。類風(fēng)濕因子以人類IgG的Fc片段為靶點(diǎn)，是發(fā)現(xiàn)的第一組自身抗體，包括IgG和IgM等各類亞型。遺憾的是RF并不是針對RA的特異性抗體，在其他自身免疫病和高齡人群中也會有RF的出現(xiàn)。更重要的是，在高達(dá)15％的健康人群中也可以檢測到RF。隨著研究的深入，1964年和1979年，人們分別發(fā)現(xiàn)了RA患者中存在的其它抗體，即抗核周因子抗體(APF)和抗角蛋白抗體(AKA)。盡管這兩種抗體對診斷RA的特異性很高，但這些自身抗體很難測到。因此，在日常實(shí)踐中，RF仍被輔助用于RA的診斷。為此，RF陽性被納入1987年ACR的RA標(biāo)準(zhǔn)。直到1995年人們才發(fā)現(xiàn)抗核周蛋白和抗角蛋白抗體是相同的自身抗體，它們共同的靶點(diǎn)都來自精氨酸殘基的去亞胺化所形成的的瓜氨酸殘基。于是，2002年通過研發(fā)瓜氨酸化肽(CCP)-2技術(shù)出現(xiàn)了首個測定ACPA的商業(yè)化測試，使ACPA能夠作為RA常規(guī)檢查的生物標(biāo)志物。對這個獨(dú)特的自身抗體系統(tǒng)進(jìn)行深入研究，加深了人們對RA的理解和分類，因此，RF和ACPA都成為ACR/EULAR2010分類標(biāo)準(zhǔn)的一部分。