[發明專利]胸腺肽的提取方法

在審

• 申請號: 201710080451.4
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN106755246A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 張恒
• 申請（專利權）人: 國肽生物科技（北京）有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/22;A61P37/04
• 代理公司: 北京中企鴻陽知識產權代理事務所(普通合伙)11487
• 代理人: 郭鴻雁

技術領域

本發明涉及一種肽的分離方法，，特別是涉及一種從牛胸腺組織中運用生物酶解技術進行小分子活性肽的提取方法。

背景技術

胸腺為機體的重要淋巴器官。其功能與免疫緊密相關，是T細胞分化、發育、成熟的場所，還可以分泌胸腺激素及激素類物質，具內分泌機能的器官。胸腺肽是胸腺組織分泌的具有生理活性的一組多肽，能促使有絲分裂原激活后的外周血中的T淋巴細胞成熟，增加T細胞在各種抗原或致有絲分裂原激活后各種淋巴因子的分泌，增加T細胞上淋巴因子受體的水平。它同時通過對T4輔助細胞的激活作用來增強淋巴細胞反應，具有調節和增強人體細胞免疫功能的作用。

目前上市場流通的胸腺肽產品均為肽類藥物，廣泛應用于醫藥學領域：如胸腺肽腸溶片、胸腺肽注射液等。醫藥用胸腺肽提純度高，肽的種類單一，專門針對性治療某一種疾病，其制作工藝為以氨基酸為原材料，用化學試劑進行人工嫁接合成出來的單一肽類物質。因有化學試劑殘留，不可避免的會對人體有一定的毒副作用和不良反應。

發明內容

本發明是為了解決以上技術問題，而提供了一種胸腺肽的提取方法，該方法能夠通過安全而先進的生物提取技術，將牛胸腺中其豐富的組織蛋白經過生物酶解定向酶切成小分子活性肽，即胸腺肽。其結構和功能與人體非常接近，而且分子小，可被腸道直接吸收，快捷參與人體的正常代謝與調節，在藥理學上，具有更高的生化機制合理性和特異治療有效性。胸腺肽具有針對性強、無毒副作用、療效顯著、營養價值高、易被人體吸收等特點。

本發明涉及一種胸腺肽的提取方法，所述提取方法包括以下步驟：

一、清洗：將牛胸腺用醋酸溶液進行酸洗，時間0.5～1.5h；然后用水洗一次，再用醋酸溶液酸洗一次，時間0.5～1.5h，再水洗一次，得到清洗過的牛胸腺；。

二、蒸煮：向蒸煮罐中加入水，邊攪拌邊升溫，同時加入步驟一中清洗過的牛胸腺與食用醋酸，升溫至蒸煮罐下部55℃上部65℃，保溫60min；停止攪拌，靜置0.5～1.5h，上清即為一次湯；

三、除渣：靜置結束立即用真空抽提罐將一次湯泵入滅菌后的一次湯儲罐；此時湯溫在55℃左右；

四、水解：將一次湯泵入滅菌后的水解罐，升溫至100℃保持15min滅菌，降溫至55～65℃并保持，加入配置堿液調整pH值至中性，投入酶制劑水解7～9h，然后升溫至90℃保溫15min滅酶活；

五、過濾：按比例投入硅藻土、活性炭攪拌，靜置，粗過濾后，利用板框過濾器循環過濾0.5～1.5h，得到清液；

六、濃縮：利用真空濃縮器將清液濃縮至濃度18～22°Bé，得到濃縮液；

七、噴霧干燥：當濃縮液澄清時，進行噴霧干燥，即制得胸腺肽；

當濃縮液渾濁時，先將濃縮液進行板框過濾或用管式離心機分離，然后再進行噴霧干燥，即制得胸腺肽；

所述步驟一中醋酸溶液為食用醋酸與水的混合溶液，醋酸溶液中食用醋酸的量為10～40vol％。

優選地，所述步驟一中牛胸腺與醋酸溶液的質量比為1:2～10；步驟二中的蒸煮罐為常溫蒸煮罐。

優選地，所述步驟一中清洗過的牛胸腺在30min內加入步驟二中的蒸煮罐。

優選地，所述步驟四中堿液為NaOH溶液。

優選地，所述步驟五中粗過濾為依次采用桶式過濾器和兩級板框過濾器過濾。

優選地，所述步驟七中噴霧干燥的參數為：進風溫度200℃，出風溫度95℃。

本發明的方法是采用以下技術方案：胸腺肽是采用天然放養的小牛體內新鮮的胸腺組織，經過低溫處理、組織搗碎、滅菌、生物酶解、提純、濃縮、高溫瞬時干燥而制成的高純度小分子肽。胸腺肽的分子量分布在500道爾頓以下，是分子極小的功能肽，活性超強，極易被人體或肌膚吸收，能夠快捷參與細胞生理活動，具有超強的提高人體免疫的功能。

本發明胸腺肽的提取方法與現有技術不同之處在于：

1.本發明的方法制備得到的胸腺肽能連續誘導T細胞分化發育的各個階段。

2.本發明的方法制備得到的胸腺肽具有調節機體的免疫平衡的作用。

3.本發明的方法制備得到的胸腺肽能增強成熟T細胞對抗原或其它刺激的反應。

4.本發明的方法制備得到的胸腺肽對全身性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎等自身免疫性疾病有療效；應用于復發性口瘡、麻風、重癥感染、慢性腎炎等伴有細胞免疫功能低下的患者，對病毒性肝炎、惡性腫瘤、某些眼病也有特殊療效。