[發(fā)明專利]一種甲基纖維素和檸檬酸三鈉雙水相萃取分離藻藍蛋白的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710080079.7 | 申請日： | 2017-02-15 |
| 公開（公告）號： | CN107325175A | 公開（公告）日： | 2017-11-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 鄭祖鳳;鄭訓藝 | 申請（專利權(quán)）人： | 江西中藻生物科技股份有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/795 | 分類號： | C07K14/795;C07K1/14;C07K1/34 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 342500 江西*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 甲基纖維素 檸檬酸 三鈉雙水相 萃取 分離 蛋白 方法 | ||
1.一種甲基纖維素和檸檬酸三鈉雙水相萃取分離藻藍蛋白的方法，其特征在于包括如下步驟：
(1)制備藻藍蛋白粗提取液：用去離子水清洗新鮮的螺旋藻2-4次，洗滌干凈的螺旋藻，經(jīng)壓力為210-420kg/cm2的高壓細胞勻漿機，破碎時間為5-6min，超聲波處理時間為12-14min，將破碎的螺旋藻懸濁液于離心機中，離心時間為10-18min，離心收集上清液，制得含藻藍蛋白的粗提液于4-5℃下儲存；
(2)雙水相萃取：向步驟(1)所得含藻藍蛋白的粗提液中加入甲基纖維素和檸檬酸三鈉，震蕩混合時間為1-2h，靜置分相，藻藍蛋白富集于上相；
(3)采用膜孔徑為3-5um的濾膜對藻藍蛋白粗提液進行粗過濾，處理時間為20-26小時，再于-10--12℃冷凍干燥10-12小時，制得雙水相萃取藻藍蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述甲基纖維素和檸檬酸三鈉雙水相萃取分離藻藍蛋白的方法，其特征在于：在步驟(1)中，所述離心速率為800-1000r/min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述甲基纖維素和檸檬酸三鈉雙水相萃取分離藻藍蛋白的方法，其特征在于：在步驟(2)中，所述甲基纖維素的質(zhì)量為雙水相體系總質(zhì)量的9-13％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述甲基纖維素和檸檬酸三鈉雙水相萃取分離藻藍蛋白的方法，其特征在于：在步驟(2)中，所述檸檬酸三鈉為雙水相體系總質(zhì)量的17-25％。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述甲基纖維素和檸檬酸三鈉雙水相萃取分離藻藍蛋白的方法，其特征在于：在步驟(2)中，含藻藍蛋白的粗提液的質(zhì)量為雙水相體系總質(zhì)量的65-70％。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述甲基纖維素和檸檬酸三鈉雙水相萃取分離藻藍蛋白的方法，其特征在于：在步驟(3)中，所述濾膜的流速為150mL/min，滲透通量為60L/(h·m2)。
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