[發明專利]一種華南錐無性繁殖的方法

在審

• 申請號: 201710079802.X
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN106879465A
• 公開（公告）日: 2017-06-23
• 發明（設計）人: 唐春艷;陳素云
• 申請（專利權）人: 唐春艷;陳素云
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣西南寧匯博專利代理有限公司45114
• 代理人: 蘭如康

技術領域

本發明屬于植物繁殖技術領域，涉及一種華南錐無性繁殖的方法。

背景技術

華南錐（Castanopsis concinna (Champ. ex Benth.) A. DC.），殼斗科錐屬，常綠喬木，高10-15米，很少達20米，胸徑達50厘米，當年生枝及花序軸被黃或紅棕色微柔毛及頗厚的細片狀易抹落的蠟鱗層，三年生枝無或幾無毛。分布于中國珠江三角洲以西南至廣西岑溪、防城一帶，北限見于廣東的廣寧縣（越過北回歸線稍北），沿海島嶼只見于香港。生于海拔約500米以下花崗巖風化的紅壤丘陵坡地常綠闊葉林中。種子含淀粉，種仁可作木本糧食，味道能與板栗媲美；木材顏色鮮艷，材質堅重有彈性，耐水濕，是家具、器械、建筑的優良用材。是中國國家Ⅱ級重點保護野生植物。

目前，華南錐有性繁殖主要靠雜交授粉完成，即選用不同品種或同品種不同株間相互授粉，然而有性繁殖周期較長。組織培養技術是一種快速無性繁殖技術，選擇華南錐優良家系或者無性系為材料，通過組織培養方法繁殖苗木，既可以滿足生產上的數量要求，又可保持母本性狀。

發明內容

本發明的目的是針對黃檀組織培養過程中芽增殖系數低，生長緩慢等問題,提供一種生長效果好、擴繁快的黃檀嫩枝組培繁殖方法。

為了實現上述發明目的，本發明的技術方案如下：

一種華南錐無性繁殖的方法，包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導培養、增殖培養、壯芽培養和生根培養工序，采集半木質化、生長健壯的當年生黃檀嫩枝作為外植體，對外植體進行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導培養基中獲取初始芽，再將初始芽接種于增殖培養基中經過3-4個周期增殖培養，形成叢生芽，將叢生芽接入壯芽培養基中培養，最后將高≥2cm的單芽插入生根培養基中誘導生根，具體操作步驟如下：

（1）外植體選擇：采集半木質化、生長健壯的當年生黃檀嫩枝作為外植體；

（2）外植體處理：將外植體置于自來水下沖洗10-15 min，然后去除外植體葉片，再將外植體浸泡在體積濃度 0.1%的升汞溶液中，控制浸泡時間15-20 min，最后用純凈水洗凈藥物，將外植體裁成帶至少1個腋芽，1.5-3cm長的莖段，視莖段木質化程度分類置放容器內，備用；

（3）初始芽誘導培養：將步驟（2）得到的外植體接種于初始芽誘導培養基中培養，培養30-35 d，初始芽萌發、生長；

（4）增殖培養：將高≥1cm的初始芽接入增殖培養基中進行增殖培養，35-40 d轉接一次，循環往復，經3-4個周期的培養，形成叢生芽；

（5）壯芽培養：將步驟（4）得到的叢生芽進行切割，4-5顆芽/叢，插入壯芽培養基中，培養35-40 d，形成壯芽；

（6）生根培養：將步驟（5）得到的高≥2cm的單芽插入生根培養基中誘導生根；余下小芽叢再次接種于步驟（4）的增殖培養基中繼續增殖，然后再重復步驟（5），循環往復，獲得大量壯芽。

以上所述的初始芽誘導培養基的配方為：1/2改良MS培養基+TDZ 4.0-6.0 mg/L+NAA 2.0-3.0 mg/L+KT 1.0-2.0 mg/L+ZT 1.5-2.0 mg/L+ VC 15 mg/L+葉酸10mg/L+VB₂ 15 mg/+瓊脂3.0 g/L+葡萄糖25 g/L。

以上所述的增殖培養基的配方為：改良1/2MS培養基+TDZ 6.0-8.0 mg/L+NAA 2.0-3.0 mg/L+ZT 0.5-1.0 mg/L+VC 15 mg/L+VB₂ 15 mg+L-半胱氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.6 g/L+葡萄糖 30 g/L。

以上所述的壯芽培養基的配方為：改良MS培養基+TDZ 3.0-4.0 mg/L+NAA 1.0-1.5 mg/L+VC 15 mg/L+VB₂ 15 mg+L-半胱氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+葡萄糖 25 g/L。

以上所述的生根培養基的配方為：1/2改良MS培養基+TDZ 1.5-2.5 mg/L+NAA 1.0-1.5 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+葡萄糖 30 g/L。