[發明專利]一種金剛烷胺殘留的快速檢測試劑盒及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710079790.0
• 申請日: 2017-02-15
• 公開（公告）號: CN108426999B
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發明（設計）人: 張勛;吳雨萌;倫麗麗;李奇富
• 申請（專利權）人: 江蘇美正生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/68;G01N21/64
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 康瀟

1.一種金剛烷胺殘留的快速檢測試劑盒，其包括檢測卡和熒光試劑微孔，其中：

所述檢測卡包括試紙條和用于容納所述試紙條的外殼，所述試紙條包括底板、樣品墊、層析膜和吸水墊，其中：

所述底板上依次固定有所述樣品墊、層析膜和吸水墊，所述樣品墊的始端與所述底板的始端對齊，所述樣品墊的末端與所述層析膜的始端相連，所述層析膜的末端與所述吸水墊的始端相連，所述吸水墊的末端與所述底板的末端對齊；

所述層析膜的基材上設置有用于包被金剛烷胺-載體蛋白偶聯物的檢測區和用于包被羊抗鼠二抗的質控區，所述檢測區位于接近所述樣品墊的一側，所述質控區位于遠離所述樣品墊的一側；

所述外殼上設置有加樣孔和觀察孔；當所述外殼中容納有所述試紙條時，所述加樣孔位于所述樣品墊的上方，所述觀察孔位于所述層析膜的上方，并且通過所述觀察孔能夠觀察到所述檢測區和所述質控區；

所述熒光試劑微孔包括金剛烷胺單克隆抗體標記的時間分辨熒光微球和用于容納所述金剛烷胺單克隆抗體標記的時間分辨熒光微球的可密封容器；

所述金剛烷胺-牛血清白蛋白偶聯物由3-氨基-1-金剛烷醇和BSA載體蛋白經偶聯反應制成，具體過程如下：

稱取3mg 3-氨基-1-金剛烷醇和20mg N,N'-羰基二咪唑，溶解于無水1mL DMF中，室溫密封避光，磁力攪拌過夜，此為A液；將10mg BSA溶解于pH＝9.6的5mL、0.05M碳酸鹽緩沖液中，然后在磁力攪拌條件下逐滴加入所述A液，室溫密封避光，磁力攪拌過夜；收集反應后的溶液，裝入處理好的透析袋中，在0.01MPBS中透析，每8h換液一次，總共換液6次；收集透析袋中液體，采用商品化BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度，分裝后于-20℃保存，得到所述金剛烷胺-牛血清白蛋白偶聯物。

2.根據權利要求1所述的金剛烷胺殘留的快速檢測試劑盒，其特征在于：

所述外殼由聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚碳酸酯、聚丙烯或聚乙烯制成；

所述底板由聚氯乙烯或聚苯乙烯制成；

所述樣品墊由玻璃纖維、聚酯纖維、吸水濾紙或濾血膜制成；

所述層析膜的基材由硝酸纖維素膜制成；

所述吸水墊由吸水紙制成。

3.根據權利要求1所述的金剛烷胺殘留的快速檢測試劑盒，其特征在于：

所述金剛烷胺單克隆抗體通過如權利要求1所述的金剛烷胺-牛血清白蛋白偶聯物作為免疫原對小鼠進行免疫而獲得。

4.根據權利要求1所述的金剛烷胺殘留的快速檢測試劑盒，其特征在于：

所述時間分辨熒光微球為內部包裹含銪配合物、外部修飾羧基官能團的聚苯乙烯微球。

5.根據權利要求4所述的金剛烷胺殘留的快速檢測試劑盒，其特征在于：

所述時間分辨熒光微球的直徑為100～300nm，激發波長為365nm，發射波長為610nm。

6.根據權利要求1所述的金剛烷胺殘留的快速檢測試劑盒，其特征在于：

所述可密封容器為采用錫箔紙不干膠進行密封的酶標板。