[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)細(xì)菌多糖的菌株及其發(fā)酵中藥廢棄物制備多糖的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710077738.1
• 申請(qǐng)日: 2017-02-14
• 公開（公告）號(hào): CN106754562B
• 公開（公告）日: 2020-06-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬新飛;張森;段金廒;郭盛;陶偉偉;肖平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12P19/04;C12R1/01
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 吳頻梅

1.一種高產(chǎn)細(xì)菌多糖的菌株，其特征在于，保藏名稱：中間蒼白桿菌ZY03(Intermediate ochrobactrum ZY03)，保藏單位：中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址：中國(guó)武漢大學(xué)，保藏日期：2016年5月20日；保藏號(hào)為CCTCC M 2016273。

2.一種如權(quán)利要求1所述的高產(chǎn)細(xì)菌多糖的菌株的用途，其特征在于，所述高產(chǎn)細(xì)菌多糖的菌株ZY03在制備多糖中的應(yīng)用。

3.一種根據(jù)權(quán)利要求l所述的中間蒼白桿菌ZY03發(fā)酵中藥廢棄物制備多糖的方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

步驟 (1) ： 以中間蒼白桿菌ZY03為生產(chǎn)菌株，接種于培養(yǎng)基中，在溫度30℃、180rpm轉(zhuǎn)速、通風(fēng)比1∶1培養(yǎng)基中培養(yǎng)18-24小時(shí)，獲種子培養(yǎng)液；

步驟(2)搖床培養(yǎng)：將步驟(1)所述種子培養(yǎng)液接種于多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，搖床中發(fā)酵3-5天；

步驟(3)細(xì)菌粗多糖的提取：發(fā)酵液經(jīng)高速離心去除菌體，上清液真空濃縮至原液體積的1/3，用1-3倍體積的無水乙醇沉淀，離心取沉淀，沉淀物采用Sevag法去蛋白，再經(jīng)乙醇沉淀，沉淀物經(jīng)等量的75％乙醇洗滌2～3次，烘干后得胞外粗多糖產(chǎn)品；

所述步驟(2)的多糖發(fā)酵培養(yǎng)基是中藥藥渣培養(yǎng)基，培養(yǎng)基組分以質(zhì)量百分含量計(jì)組分如下：中藥藥渣20-40％，(NH4)2SO4 0.8％，KH2PO4 0.5％，CaCl2 0.02％，MgSO40.01％；pH自然，其中中藥藥渣是五味子藥渣、甘草藥渣、板藍(lán)根藥渣中的一種或幾種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的中間蒼白桿菌ZY03發(fā)酵中藥廢棄物制備多糖的方法，其特征在于，所述步驟(1)的碳源是已經(jīng)霉變的中藥藥渣。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的中間蒼白桿菌ZY03發(fā)酵中藥廢棄物制備多糖的方法，其特征在于，所述步驟(1)所述的培養(yǎng)基，是天然培養(yǎng)基。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的中間蒼白桿菌ZY03發(fā)酵中藥廢棄物制備多糖的方法，其特征在于，所述步驟(1)所述的培養(yǎng)基是馬鈴薯培養(yǎng)基。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的中間蒼白桿菌ZY03發(fā)酵中藥廢棄物制備多糖的方法，其特征在于，所述步驟(2)的搖床培養(yǎng)，種子培養(yǎng)液接種于 多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中的質(zhì)量濃度為2％～10％。