[發明專利]一種生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸所用的菌株及其生產方法

有效

• 申請號: 201710076936.6
• 申請日: 2017-02-13
• 公開（公告）號: CN106701637B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 秦艷;申乃坤;王青艷;朱婧;李億
• 申請（專利權）人: 廣西科學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/46;C12R1/01
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務所(普通合伙) 11732
• 代理人: 周新楣

1.一種生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸所用的菌株，其特征在于：該菌株為產琥珀酸放線桿菌(Actinobacillussuccinogenes)XT，保藏編號為CCTCC NO：M2016397。

2.一種生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，包括利用權利要求1所述的產琥珀酸放線桿菌發酵產丁二酸。

3.一種如權利要求2所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，包括以下步驟：將平板上的產琥珀酸放線桿菌XT單菌落接入種子培養基中，在厭氧培養箱中培養16-20h，然后按5%(V：V)接種量進行二級擴繁培養8h，即得到種子液；按5-10%(V：V)的接種量將種子液接種到發酵培養基中，利用pH緩沖劑調節發酵液pH維持在5.5-7.0，在充滿N₂或CO₂的環境中，在30-38℃分批發酵或分批補料發酵40-84h，即得丁二酸。

4.根據權利要求3所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，所述種子培養基的成分及濃度為：葡萄糖20 g/L，酵母粉10 g/L，玉米漿4 g/L，NaHCO₃ 4 g/L，NaH₂PO₄ 9.6 g/L，K₂HPO₄ 1.55 g/L。

5.根據權利要求3所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，分批發酵時所述發酵培養基的成分及濃度為：粗甘油30-100 g/L，氮源5-20 g/L，磷酸二氫鉀2-10 g/L，二甲基亞楓0-20 g/L，碳酸氫鈉2-10 g/L，氯化鈣0.3-1.0 g/L，氯化鎂0.3-1.0g/L。

6.根據權利要求3所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，分批補料發酵時所述發酵培養基的成分及濃度為：初始粗甘油20-30g/L，氮源5-20g/L，磷酸二氫鉀2-10g/L，二甲基亞楓0-20g/L，碳酸氫鈉2-10g/L，氯化鈣0.3-1.0g/L，氯化鎂0.3-1.0g/L，通過補料的方式維持罐內粗甘油濃度在20-30g/L，補料用粗甘油500g/L。

7.根據權利要求5或6所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，所述氮源為玉米漿、酵母粉、大豆粉、花生餅粉中的一種或幾種以任意比例混合。

8.根據權利要求3所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，所述pH調節劑是堿式碳酸鎂、碳酸鈉、氫氧化鎂、氫氧化鈉中的一種或幾種以任意比例混合，總濃度為20-80 g/L。

9.根據權利要求7所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，分批發酵時所述發酵培養基的成分及濃度為：粗甘油50 g/L，玉米漿12 g/L，磷酸二氫鉀8 g/L，二甲基亞楓10 g/L，碳酸氫鈉6 g/L，氯化鈣0.7 g/L，氯化鎂0.6 g/L。

10.根據權利要求7所述生物柴油副產物粗甘油發酵產丁二酸的方法，其特征在于，分批補料發酵時所述發酵培養基的成分及濃度為：初始粗甘油25 g/L，玉米漿12 g/L，磷酸二氫鉀8 g/L，二甲基亞楓10 g/L，碳酸氫鈉6 g/L，氯化鈣0.7 g/L，氯化鎂0.6 g/L，通過補料的方式維持罐內粗甘油濃度在25 g/L，補料用粗甘油500 g/L。