[發(fā)明專利]牛蒡苷及苷元在制備抗肺纖維化藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710073920.X
• 申請(qǐng)日: 2017-02-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106692172A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-05-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 竇德強(qiáng);聞曉鑫;冉小庫(kù);張娜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/7048
• 分類號(hào): A61K31/7048;A61K31/365;C07H15/26;C07H1/08;C07D307/33;A61P11/00
• 代理公司: 沈陽(yáng)亞泰專利商標(biāo)代理有限公司21107
• 代理人: 史力伏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及兩種中藥單體成分的藥理作用及其應(yīng)用，尤其涉及以牛蒡苷和苷元為活性成分的藥物及其在制備抗肺纖維化藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

牛蒡子為菊科(Compositae)牛蒡?qū)?Arctium)植物牛蒡(Arctium lappa)的干燥成熟果實(shí)。牛蒡子的主要藥效成分為牛蒡苷，我們的研究結(jié)果（He Fan, Dou De-Qiang,Sun Yu,Zhu Lin,Xiao Hong-Bin, Kang Ting-Guo. Plasma pharmacokinetics and tissue distribution of arctiin and its main metabolite in rats by HPLC-UV and LC-MS. Planta Medica 2012, 78:800-806.），和國(guó)外報(bào)道均表明牛蒡苷是通過(guò)在胃腸道中代謝成牛蒡苷元而發(fā)揮其藥效的。

肺維化是一種慢性、進(jìn)行性、不可逆轉(zhuǎn)也是最常見(jiàn)的一種致命性肺疾病，主要表現(xiàn)為成纖維細(xì)胞灶( fibroblastic foci) 的出現(xiàn)導(dǎo)致大量細(xì)胞外基質(zhì)( extracellular matrix，ECM) 沉積，膠原積聚，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，最終導(dǎo)致正常肺組織結(jié)構(gòu)的破壞（孔勤,陳民利. 特發(fā)性肺纖維化發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2012,08:74-80.）。目前治療手段主要以西藥，尤其是激素類藥物為主，一般只能改善癥狀，不能控制其進(jìn)程；并且長(zhǎng)期應(yīng)用，療效減弱且毒性增大，總體來(lái)說(shuō)目前臨床上尚沒(méi)有合適的治療藥物。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種牛蒡苷及苷元的新用途,即牛蒡苷或苷元單獨(dú)或與其它藥物合用，用于制備抗肺纖維化的藥物。

所述牛蒡苷的制備方法：取牛蒡子（炒制品）粗粉（牛蒡苷含量5.2%），用水煎煮提取多次；合并提取液，減壓濃縮后，加95%乙醇，4℃醇沉12小時(shí)，過(guò)濾，取上清液，減壓濃縮至近干，得浸膏；浸膏用甲醇溶解，用浸膏等重量的100-120目硅膠拌樣，用浸膏等重量的200-300目硅膠分離，用氯仿-甲醇洗脫，得到含有牛蒡苷的餾分，合并含有牛蒡苷的餾分，濃縮后加95%乙醇結(jié)晶，得牛蒡苷單體化合物(牛蒡苷含量大于95%)。

所述牛蒡苷元的制備方法，取牛蒡子（生品）粗粉（牛蒡苷含量5.2%），加3倍量水，40℃溫孵4個(gè)小時(shí)，加95%乙醇和水調(diào)節(jié)成10倍量60%乙醇提取液，加熱回流煎煮；繼續(xù)用60%乙醇提取；合并提取液，濃縮近干；經(jīng)硅膠柱分離，用100目硅膠按樣品量1:1拌樣，200-300目硅膠1:1進(jìn)行柱層析，氯仿-甲醇洗脫，合并含有牛蒡苷元的流分，用乙醇重結(jié)晶，得牛蒡苷元單體化合物（牛蒡苷元含量大于95%）。

所述的制備牛蒡苷和牛蒡苷元單體化合物，純度大于90%，符合中藥一類新藥的開(kāi)發(fā)要求。

本發(fā)明的有益效果。

本發(fā)明公開(kāi)了一種中藥牛蒡子中活性成分牛蒡苷和苷元在制備抗肺纖維化藥物方面的應(yīng)用，牛蒡苷和牛蒡苷元為中藥牛蒡子中的主要活性成分。我們?cè)鴮?duì)牛蒡苷和苷元的制備工藝進(jìn)行研究，目前可以對(duì)牛蒡苷及其苷元單體進(jìn)行大量制備（竇德強(qiáng)，侯墻，康廷國(guó)，李鴻福. 一種牛蒡子苷元的制備方法，專利號(hào)：ZL200910220575.3.），通過(guò)體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果表明，我們發(fā)現(xiàn)牛蒡苷及其苷元具有較強(qiáng)的抗博來(lái)霉素引起的肺纖維化作用。我們的研究結(jié)果表明，牛蒡苷元為牛蒡苷的代謝產(chǎn)物和吸收入血的活性成分之一，因此牛蒡苷為牛蒡苷元的前體藥物。研究結(jié)果證明，牛蒡苷和苷元均可應(yīng)用于抗肺纖維化疾病的藥物中。本發(fā)明中的牛蒡苷和苷元在抗肺纖維化方面有較強(qiáng)的活性，副作用小，價(jià)格便宜，具有較好的成藥性。

附圖說(shuō)明

圖1空白組和模型組肺的表觀情況,其中A為空白組，B為模型組。

圖2牛蒡苷及苷元對(duì)肺系數(shù)的影響。

圖3牛蒡苷及苷元對(duì)肺通透系數(shù)的影響。

圖4牛蒡苷及苷元對(duì)HYP含量的影響。

圖5牛蒡苷及苷元對(duì)MPO活性的影響。

圖6牛蒡苷及苷元對(duì)MDA含量的影響。

圖7牛蒡苷及苷元對(duì)LDH活性的影響。

圖8牛蒡苷及苷元對(duì)TGF-β含量的影響。

圖9牛蒡苷及苷元對(duì)NF-κB含量的影響。

圖10牛蒡苷及苷元對(duì)TNF-α含量的影響。

圖11牛蒡苷及苷元對(duì)IL-6含量的影響。

圖12肺組織病理學(xué)切片觀察。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明。

實(shí)施例1。