[發明專利]一種飼料淀粉糊化度的檢測方法

在審

• 申請號: 201710073838.7
• 申請日: 2017-02-10
• 公開（公告）號: CN106770798A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 徐長躍;陳淋敏;羅滿珍;張杏莉;吳海英;張敬學;劉小成;周盛昌;楊偉春
• 申請（專利權）人: 金華傲農生物科技有限公司;漳州傲農牧業科技有限公司;廣州傲農生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廈門市新華專利商標代理有限公司35203
• 代理人: 李寧

1.一種飼料淀粉糊化度的檢測方法，其特征在于包含以下步驟：

步驟（1），取樣：稱取兩份過40目篩質量相同的飼料樣品，精確至0.0001g；

步驟（2），稱取葡萄糖標準品，用100mL容量瓶加水定容，得到標準溶液；

步驟（3），樣品處理：分別將兩份步驟（1）中的樣品置于加入50mL無水乙酸鈉-乙酸緩沖液的150mL錐形瓶中，取其中一份樣品于水浴鍋中沸水浴加熱40min±4min，然后用自來水沖淋冷卻，即為全糊化樣品，另外一份為不完全糊化樣品；分別向兩個錐形瓶中加入2mL糖化酶溶液，于40℃水浴鍋中加熱40min±4min，然后分別加入2mL硫酸溶液，搖勻后依次加入2mL鎢酸鈉溶液，再次搖勻；將兩個錐形瓶中的液體分別轉移至100mL容量瓶中加水定容后用濾紙過濾，收集濾液，得到兩份待測溶液；

步驟（4），將標準溶液和兩份待測溶液利用液相色譜進行檢測，得到葡萄糖標準品及待測溶液中各組分的保留時間及峰面積；飼料樣品的淀粉糊化度即為：(不完全糊化樣品葡萄糖峰面積/完全糊化樣品葡萄糖峰面積）×100%。

2.如權利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法，其特征在于步驟（1）中飼料樣品稱樣量控制在0.4000-1.000g之間。

3.如權利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法，其特征在于步驟（2）中葡萄糖標準品稱樣量為0.05-0.1g，精確至0.0001g。

4.如權利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法，其特征在于步驟（3）中無水乙酸鈉-乙酸緩沖液配制方法如下：取4.1g無水乙酸鈉溶于200mL水中，加3.7mL乙酸，用水定容至1000mL，溶液pH在4.4-4.7之間即可。

5.如權利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法，其特征在于步驟（3）中硫酸溶液和鎢酸鈉溶液為蛋白沉淀劑，硫酸溶液配制方法：將10mL濃硫酸用水稀釋至100mL；鎢酸鈉溶液配制方法：取12.0g鎢酸鈉溶于100mL水中。

6.如權利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法，其特征在于步驟（3）中所使用的糖化酶酶活為12000U/g；酶溶液配制方法如下：取1g復合淀粉酶溶于10mL步驟（3）中無水乙酸鈉-乙酸緩沖液，反復震蕩后，過濾，取濾液，現用現配。

7.如權利要求1所述的一種飼料淀粉糊化度的檢測方法，其特征在于步驟（4）所述的液相色譜以水為流動相，所述液相色譜采用等度洗脫方式。