[發明專利]淋巴細胞提取裝置及提取方法

在審

• 申請號: 201710072789.5
• 申請日: 2017-02-10
• 公開（公告）號: CN106701548A
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 黃誠
• 申請（專利權）人: 柳州市婦幼保健院
• 主分類號: C12M1/12
• 分類號: C12M1/12;C12N5/078
• 代理公司: 柳州市榮久專利商標事務所(普通合伙)45113
• 代理人: 韋微

技術領域

本發明涉及一種淋巴細胞提取裝置及提取方法。

背景技術

淋巴細胞分離提取是在臨床檢查和科學研究中常用的一種初步細胞提純方法，基本原理都是密度梯度離心法，傳統方法是將初始樣本加在淋巴細胞分離液上離心，離心后吸取單個核細胞懸浮層，最后加入生理鹽水再反復離心洗滌。傳統方法操作比較繁瑣費時，而且細胞需要在不同器具間多次轉移，還要多次離心，過程容易造成細胞丟失破損和污染。由于操作復雜繁瑣，存在細胞的提取量少，提取的工作效率低等不足之處。

發明內容

本發明要解決的技術問題是：提供一種淋巴細胞提取裝置及提取方法，該提取裝置及提取方法能夠讓需要提取的細胞始終保持在原本的容器內，而不需要的細胞和血漿等能更簡便的去除，使細胞分離提取更省時省事，工作效率細胞提取更多更純，污染的幾率更小。

解決上述技術問題的技術方案是：一種淋巴細胞提取裝置，包括注射器、分離液置換器和濾洗裝置，所述的注射器是由外筒體、拉柄、活塞和針頭構成，拉柄和活塞之間、外筒體和針頭之間可通過可拆卸方式連接，所述的分離液置換器是下端密閉、上端開口的筒體結構，分離液置換器是由儲液槽和連接段構成，分離液置換器的連接段與外筒體之間可通過可拆卸方式連接，所述的濾洗裝置包括連接筒、設置在連接筒下端的儲液筒和放置在連接筒內的混合纖維素濾膜，儲液筒的底部開有液體入口并連接有吸液管，儲液筒的側壁上開有液體出口并連接有出液管，液體入口和液體出口上均設置有止回閥，連接筒的上端與外筒體之間可通過可拆卸方式連接。

所述的外筒體上設置有外螺紋，針頭、分離液置換器的上端開口和連接筒的上端均設置有與外筒體上的外螺紋配合的內螺紋。

所述的拉柄和活塞之間是通過螺紋連接。

所述的混合纖維素濾膜的孔徑是0.5～2μm。

所述的分離液置換器的儲液槽內還裝滿有淋巴細胞分離液，分離液置換器的上端開口通過封口膜密封。

本發明的另一技術方案是：一種淋巴細胞提取方法，采用本發明所述的淋巴細胞提取裝置，具體操作步驟如下：

（1）采用注射器采集樣品外周血，將樣品采集至外筒體內；

（2）取下注射器的拉柄和針頭，將淋巴細胞分離液加入到分離液置換器中并加滿儲液槽，淋巴細胞分離液的加入量與樣品的體積比為1：0.9～1，再將分離液置換器安裝到外筒體上，然后進行離心分離，使外筒內的液體從上往下依次分層為血清、單個核細胞層和淋巴細胞分離液，分離液置換器中液體從上往下依次為淋巴細胞分離液和紅細胞，

（3）取下分離液置換器，將拉柄與活塞連接，再將濾洗裝置安裝到外筒體上，然后向上拉動拉柄從濾洗裝置的吸液管中吸入生理鹽水對外筒體內的液體進行洗滌，向下壓動拉柄將血清從濾洗裝置的排液管中排出，單個核細胞液留存在外筒體內，完成一次洗滌過程；然后反復多次抽擠生理鹽水對外筒體內的液體進行洗滌，最后在外筒體內得到的液體即為洗滌細胞懸液。

抽擠生理鹽水對外筒體內的液體進行洗滌的次數是2-3次。

淋巴細胞分離其液密度介于單個核細胞與中性粒細胞和紅細胞之間，通過離心使不同密度細胞分層，取新鮮抗凝血輕輕加于細胞分離液的液面上，離心后上至下細胞可分四層：第一層為血漿層（血清）；第二層為環狀乳白色淋巴細胞（單個核細胞層）；第三層為透明淋巴細胞分離液層；第四層為紅細胞層。本方案基于該原理將淋巴細胞分離液事先分裝于一個容器內，樣本管和容器相接即可離心，離心后紅細胞和多核細胞沉至該容器，將容器取下即可將原樣本中絕大部分的有形雜質去除，然后再對樣本管內的細胞液進行洗濾即可去除可溶性雜質。

本發明是在保持密度梯度離心法的原理上優化實驗過程，在離心分層后能通過容器的拆解實現無用成分的去除，再通過濾洗法快速對提取細胞進行洗滌。采用本發明淋巴細胞提取裝置及提取方法，能讓需要提取的細胞始終保持在原本的容器內，而別的細胞和血漿等能更簡便的去除。即本發明可以將細胞一直保持在注射器的外筒體內，可以避免細胞與外界過多的接觸，也不容易造成轉移所引起的標本錯號和細胞污染，標本細胞分離和洗滌的方法比傳統方法要節省時間，并減少了一些一次性耗材的使用。

附圖說明

圖1：本發明實施例1淋巴細胞提取裝置結構示意圖。

圖2：本發明注射器分解結構示意圖。

圖3：本發明實施例2分離液置換器結構示意圖。