[發明專利]煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用

在審

• 申請號: 201710064412.5
• 申請日: 2017-02-04
• 公開（公告）號: CN106822170A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 汪年松;王鋒;尹建永;吳睿;蘆澤源;殷衛海
• 申請（專利權）人: 上海市第六人民醫院
• 主分類號: A61K31/7084
• 分類號: A61K31/7084;A61P13/12
• 代理公司: 上海申新律師事務所31272
• 代理人: 俞滌炯

技術領域

本發明涉及一種預防或治療腎臟缺血性損傷藥物，尤其涉及煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用。

背景技術

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(簡稱：輔酶Ⅰ，NAD+)，作為氧化還原過程中的必需輔酶和NAD+依賴性二磷酸腺苷(ADP)核糖基轉移酶(主要為ADP核糖基轉移酶或聚ADP核糖基聚合酶(PARP)、環ADP核糖聚合酶(cADP合酶)、Ⅲ型組蛋白去乙酰化酶(Sirtuins))唯一能利用的物質，參與細胞物質代謝、能量合成、細胞DNA修復等多種生理活動。

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的制備方法主要是以酵母為原料，酵母經沸水提取，醋酸鉛酸化沉淀得粗品，經甲酸型陽離子交換樹脂柱處理，精制而得。

申請人的先申請(申請號為201510665849)公開了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備防治心臟缺血性損傷藥物中的應用，報道了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對于心臟缺血性損傷的作用，但是現有技術中未見煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對于腎臟缺血性損傷的影響和作用。

發明內容

本發明開創性地進一步發現了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對于腎臟缺血性損傷的防治作用。

本發明提供的技術方案為：

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用。

進一步地，所述腎臟缺血性損傷為血清尿素氮和肌酐升高、腎小管損傷。

進一步地，所述藥物劑型為片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸劑、混懸劑、糖漿劑、腸溶制劑或注射劑。

另一方面，本發明還提供一種預防或治療腎臟缺血性損傷的藥物，所述藥物包括煙酰胺腺嘌呤二核苷酸；優選地，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸為藥物的唯一活性成分。

本發明采用上述技術方案，與現有技術相比，具有如下技術效果：

本發明開創性的發現了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對于腎臟缺血性損傷的防治作用，同時公開了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用以及具體能夠應用的劑型，對于防治腎臟缺血性損傷藥物的開發提供了確實可行的藥物實施方案。

附圖說明

圖1為實施例中血清中尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)水平檢測結果；

圖2為實施例中血清、尿液中的sNGAL、uKIM-1水平檢測結果；

圖3為實施例中PAS染色反應腎小管損傷的檢測結果。

具體實施方式

本發明開創性的發現了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸對于腎臟缺血性損傷的防治作用，同時公開了煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備預防或治療腎臟缺血性損傷藥物中的應用以及具體能夠應用的劑型。

本發明對煙酰胺腺嘌呤二核苷酸在制備防治腎臟損傷藥物中的應用的實驗內容主要包括以下幾個方面：

1.NAD+對腎臟缺血引起的腎臟損傷有保護作用，可以降低血清中尿素氮、肌酐水平。

2.NAD+對腎臟缺血引起的腎小管損傷具有保護作用。

下面通過具體實施例對本發明進行詳細和具體的介紹，以使更好的理解本發明，但是下述實施例并不限制本發明范圍。

實施例一

本實施例通過藥效學實驗說明NAD+在防治腎臟缺血損傷中具有明顯的治療作用。

一、實驗方法

1、動物操作

研究使用大鼠，實驗動物飼養在上海交通大學MED-X研究院進行動物實驗。所有的操作流程均符合上海交通大學實驗室動物保護和使用守則。麻醉劑選用7％水合氯醛，麻醉方式為腹腔注射，劑量1mL/100g。麻醉后對大鼠進行尾靜脈注射給藥。對照組注射生理鹽水，實驗組注射5mg/kg NAD+，給藥30min后進行腎臟缺血手術。腎臟缺血手術完成后，大鼠在動物房中進行飼養，條件為22-24℃，12小時的明/暗循環，并可自由進食取水。24h以后犧牲大鼠，取血、取尿液，取腎臟組織。

2、腎臟組織的儲存

腎臟取出后，使用液氮冷凍，之后轉移到-80℃冰箱長期保存，用于冰凍切片及后續生化檢測。

3、腎臟組織冰凍切片腎臟

使用LEICA冰凍切片機對腎臟組織進行厚度為20μm的冰凍切片，切好的切片保存于-80℃冰箱。

4、血清、尿液中的特異性腎臟損傷指標檢測。

5、PAS染色。

6、對染色結果拍照、量化。

對上述兩種染色進行拍照。并針對梗死體積等指標進行量化。

7、統計分析