[發(fā)明專利]一種兜唇石斛的質(zhì)量檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710064178.6
• 申請(qǐng)日: 2017-02-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108398510B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-03-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙田
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京藍(lán)標(biāo)一成科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京領(lǐng)科知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

本發(fā)明公開(kāi)兜唇石斛的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括：1)以ITS?26SE和ITS?17SE為引物，進(jìn)行測(cè)序，以鑒定待測(cè)石斛藥材的品種；2)對(duì)樣本容量為n的樣本進(jìn)行色譜檢測(cè)，獲取以化學(xué)小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作為參照成分的檢測(cè)數(shù)據(jù)；3)對(duì)樣本分別進(jìn)行指紋圖譜檢測(cè)，獲取兜唇石斛的全化學(xué)成分的指紋圖譜峰面積值；4)以色譜數(shù)據(jù)中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作為響應(yīng)變量，將指紋圖譜中的其它成分的峰面積值作為自變量建立分析模型，通過(guò)Lasso方法篩選變量建立化學(xué)小分子成分的相關(guān)特征指紋圖譜模型。通過(guò)一代測(cè)序及特征指紋圖譜，精確地鑒別和控制兜唇石斛藥材的質(zhì)量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥成份檢測(cè)分析領(lǐng)域，具體涉及一種兜唇石斛的質(zhì)量檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

兜唇石斛(學(xué)名：Dendrobium aphyllum(Roxb.)C.Fischer)：又名天宮石斛。莖下垂，肉質(zhì)，細(xì)圓柱形，長(zhǎng)30cm～60cm，直徑0.4cm～0.7cm，不分枝，具多節(jié)，節(jié)間長(zhǎng)2cm～3.5cm；葉基部具鞘，葉鞘紙質(zhì)，干后淺白色，鞘口呈杯狀張開(kāi)。總狀花序幾乎無(wú)花序軸，每1朵～3朵為一束，從落葉的老莖或具葉的老莖上部發(fā)出；花序柄長(zhǎng)約0.2cm～0.5cm，基部被3枚～4枚鞘；鞘膜質(zhì)，長(zhǎng)0.2cm～0.3cm；花苞片淺白色，膜質(zhì)，卵形，長(zhǎng)約0.3cm，先端急尖；花梗和子房暗褐色帶綠色，長(zhǎng)2cm～2.5cm；花開(kāi)展，下垂；萼片和花瓣白色帶淡紫紅色或淺紫紅色的上部或有時(shí)全體紫紅色；中萼片近披針形，長(zhǎng)約2.3cm，寬0.5cm～0.6cm，先端近銳尖，具5條脈；側(cè)萼片與中萼片相似，等大，先端急尖，基部歪斜；萼囊狹圓錐形，長(zhǎng)約0.5cm，末端鈍；花瓣橢圓形，長(zhǎng)2.3cm，寬0.9cm～1.0cm，先端鈍，全緣，具5條脈；唇瓣寬倒卵形或近圓形，長(zhǎng)、寬各約2.5cm，兩側(cè)向上圍抱蕊柱而形成喇叭狀，基部?jī)蓚?cè)具紫紅色條紋并且收狹成為短爪，中部以上部分為淡黃色，中部以下部分淺粉紅色，邊緣具部整齊的細(xì)齒，兩面密布短柔毛；蕊柱白色，其前面兩側(cè)具紅色條紋，長(zhǎng)約0.3cm；藥帽白色，近圓錐形，頂端稍凹缺，密布細(xì)乳突狀毛，前端邊緣寬凹缺。蒴果狹倒卵形，長(zhǎng)約4cm，直徑1.2cm。全草：微苦，涼。清熱解毒。用于咳嗽，咽喉痛，口干舌燥，小兒驚風(fēng)，食物中毒，燒、燙傷。

石斛一直被人們視為珍貴的中草藥，具有十分重要的滋補(bǔ)功效。在臨床上，石斛被用于治療多種疾病，具有增強(qiáng)免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌癥等藥理功效。由于人為長(zhǎng)期無(wú)節(jié)制采挖及不合理利用石斛，其野生資源日趨減少，市場(chǎng)上出現(xiàn)了一些以假亂真、以次充好的現(xiàn)象。此外，由于石斛品種較多，其品種間的雜交使得其近緣的種存在性狀交叉現(xiàn)象，分類區(qū)別比較困難。因此，有必要建立石斛的特征指紋圖譜對(duì)石斛的藥材質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)。

色譜指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別手段，作為一種全局分析的全景模式，反映的是樣品的整體情況。但在色譜指紋圖譜分析過(guò)程中，很多數(shù)據(jù)都是高維的，即數(shù)據(jù)包含很多屬性或特征，比如有關(guān)兜唇石斛色譜指紋圖譜，就能更好地對(duì)兜唇石斛進(jìn)行描述，但在實(shí)際應(yīng)用中對(duì)高維數(shù)據(jù)直接進(jìn)行操作將會(huì)面臨“維數(shù)災(zāi)難”的問(wèn)題，“維數(shù)災(zāi)難”會(huì)導(dǎo)致建模過(guò)程所需要的樣本數(shù)隨著維數(shù)升高而呈指數(shù)級(jí)增長(zhǎng)。面對(duì)高維數(shù)據(jù)，常規(guī)的最小二乘方法不再適用，為了提高模型的可解釋性和預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確度，變量選擇變得很重要。如何高效地從眾多的變量中篩選出對(duì)因變量有重要作用的若干個(gè)變量，是在對(duì)指紋圖譜進(jìn)行分析時(shí)亟需解決的問(wèn)題。

目前國(guó)家藥典采用定量測(cè)定中藥材中某一活性成分或有效成分即小分子成分的含量的高低來(lái)評(píng)價(jià)其質(zhì)量。但研究證明，中藥的療效是來(lái)自其多種“活性成分”之間的協(xié)同作用，甚至是被普遍公認(rèn)的有效的“活性成分”與“非活性成分”之間的協(xié)同作用或“生克作用”才能達(dá)到中藥的療效，而不是某一活性成分單獨(dú)作用的結(jié)果。在中醫(yī)理論指導(dǎo)下的中藥，任何一種活性成分均不能全面反映中醫(yī)用藥所體現(xiàn)的整體療效。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種兜唇石斛的質(zhì)量檢測(cè)方法，通過(guò)一代測(cè)序鑒定石斛藥材的品種，利用Lasso方法篩選變量建立兜唇石斛中的化學(xué)小分子成分的相關(guān)特征指紋圖譜模型，通過(guò)一代測(cè)序和相關(guān)特征指紋圖譜模型準(zhǔn)確評(píng)價(jià)兜唇石斛的藥材的質(zhì)量。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：