[發明專利]一種流蘇石斛的質量檢測方法

有效

• 申請號: 201710064173.3
• 申請日: 2017-02-04
• 公開（公告）號: CN108398516B
• 公開（公告）日: 2020-12-15
• 發明（設計）人: 趙田;張國強
• 申請（專利權）人: 北京藍標一成科技有限公司
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86
• 代理公司: 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690
• 代理人: 張丹

本發明公開流蘇石斛的質量檢測方法，包括：1)以ITS?26SE和ITS?17SE為引物，進行測序，以鑒定待測石斛藥材的品種；2)對樣本容量為n的樣本進行色譜檢測，獲取以化學小分子成分夏佛托苷和/或柚皮素作為參照成分的檢測數據；3)對樣本分別進行指紋圖譜檢測，獲取流蘇石斛的全化學成分的指紋圖譜峰面積值；4)以色譜數據中夏佛托苷和/或柚皮素的成分含量值作為響應變量，將指紋圖譜中的其它成分的峰面積值作為自變量建立分析模型，通過Lasso方法篩選變量建立化學小分子成分的相關特征指紋圖譜模型。通過一代測序及特征指紋圖譜，精確地鑒別和控制流蘇石斛藥材的質量。

技術領域

本發明屬于中藥成份檢測分析領域，具體涉及一種流蘇石斛的質量檢測方法。

背景技術

流蘇石斛(學名：Dendrobium fimbriatum Hook.)：莖粗壯，斜立或下垂，質地硬，圓柱形或有時基部上方稍呈紡錘形，長50cm～85cm，直徑0.8cm～1.5cm，不分枝，具多節，干后淡黃色或淡黃褐色，節間長3.5cm～4.8cm，具多數縱槽；葉基部具緊抱于莖的革質鞘。總狀花序長5cm～15cm，疏生6朵～12朵花；花序軸較細，多少彎曲；花序柄長2cm～4cm，基部被數枚套疊的鞘；鞘革質，筒狀，位于基部的最短，長約0.3cm，頂端的最長，達1cm；花苞片膜質，卵狀三角形，長0.3cm～0.5cm，先端銳尖；花梗和子房淺綠色，長2.5cm～3cm；花金黃色，質地薄，開展，稍具香氣；中萼片長圓形，長1.3cm～1.8cm，寬0.6cm～0.8cm，先端鈍，邊緣全緣，具5條脈；側萼片卵狀披針形，與中萼片等長而稍狹窄，先端鈍，基部歪斜，全緣，具5條脈；萼囊近圓形，長約0.3cm；花瓣長圓狀橢圓形，長1.2cm～1.9cm，寬0.7cm～1.0cm，先端鈍，邊緣微嚙蝕狀，具5條脈；唇瓣比萼片和花瓣的顏色深，近圓形，長1.5cm～2cm，基部兩側具紫紅色條紋并且收狹為長約0.3cm的爪，邊緣具復流蘇，唇瓣具一個新月形橫生的深紫色斑塊，上面密布短絨毛；蕊柱黃色，長約0.2cm，具長約0.4cm的蕊柱足；藥帽黃色，圓錐形，光滑，前端邊緣具細齒。流蘇石斛的莖可入藥，味甘，微寒。益胃生津，滋陰清熱，可用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明。外用治跌打損傷，骨折傷筋；內服治咽喉癢，咳嗽。

石斛一直被人們視為珍貴的中草藥，具有十分重要的滋補功效。在臨床上，石斛被用于治療多種疾病，具有增強免疫力、抗氧化、降血糖和抑制癌癥等藥理功效。由于人為長期無節制采挖及不合理利用石斛，其野生資源日趨減少，市場上出現了一些以假亂真、以次充好的現象。此外，由于石斛品種較多，其品種間的雜交使得其近緣的種存在性狀交叉現象，分類區別比較困難。因此，有必要建立石斛的特征指紋圖譜對石斛的藥材質量進行評價。

色譜指紋圖譜是一種綜合的、可量化的鑒別手段，作為一種全局分析的全景模式，反映的是樣品的整體情況。但在色譜指紋圖譜分析過程中，很多數據都是高維的，即數據包含很多屬性或特征，比如有關流蘇石斛色譜指紋圖譜，就能更好地對流蘇石斛進行描述，但在實際應用中對高維數據直接進行操作將會面臨“維數災難”的問題，“維數災難”會導致建模過程所需要的樣本數隨著維數升高而呈指數級增長。面對高維數據，常規的最小二乘方法不再適用，為了提高模型的可解釋性和預測的準確度，變量選擇變得很重要。如何高效地從眾多的變量中篩選出對因變量有重要作用的若干個變量，是在對指紋圖譜進行分析時亟需解決的問題。

目前國家藥典采用定量測定中藥材中某一活性成分或有效成分即小分子成分的含量的高低來評價其質量。但研究證明，中藥的療效是來自其多種“活性成分”之間的協同作用，甚至是被普遍公認的有效的“活性成分”與“非活性成分”之間的協同作用或“生克作用”才能達到中藥的療效，而不是某一活性成分單獨作用的結果。在中醫理論指導下的中藥，任何一種活性成分均不能全面反映中醫用藥所體現的整體療效。

發明內容

本發明提供了一種流蘇石斛的質量檢測方法，通過一代測序鑒定石斛藥材的品種，利用Lasso方法篩選變量建立流蘇石斛中的化學小分子成分的相關特征指紋圖譜模型，通過一代測序和相關特征指紋圖譜模型準確評價流蘇石斛的藥材的質量。