[發明專利]一種用于人FKBPL蛋白的酶聯免疫檢測及制備方法

在審

• 申請號: 201710061908.7
• 申請日: 2017-01-27
• 公開（公告）號: CN108362870A
• 公開（公告）日: 2018-08-03
• 發明（設計）人: 趙以睿;王慕元;王力軍;刑田徑
• 申請（專利權）人: 武漢三鷹生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/543
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本發明涉及一種酶聯免疫及其檢測方法，是一種新的抗人FKBPL蛋白的單抗包被酶標板及酶聯免疫試劑盒的制備方法。其關鍵之處主要在于用基因工程方法制備特異性的鼠抗人FKBP蛋白的單抗，并將此抗體純化后包被于酶標板上，做為試劑盒的一部分。試劑盒還包括FKBPL的重組蛋白標準品、抗人FKBPL蛋白的多抗、辣根過氧化物酶標記的二抗、樣本稀釋液、抗體稀釋液、顯色液、終止液。試劑盒建立了快捷簡便測定人血清和血漿中FKBPL蛋白濃度的測定方法。試劑盒主要用于供科學研究和臨床實驗的研究使用。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體地說涉及一種檢測人FKBPL蛋白(FK506結合蛋白類似蛋白)的酶聯免疫檢測試劑盒。本發明還涉及上述試劑盒的制備方法。

背景技術

FKBPL(FK506-binding protein like)即FK506結合蛋白，與免疫親和素蛋白家族很相似，能夠參與免疫調控以及細胞過程中的蛋白質折疊和運輸。FKBPL被認為對射線誘導的抵抗能力方面有潛在的作用，還能夠參與到細胞周期的調控中。FKBPL蛋白能夠參與對細胞應激的應答，在1999年首次被單獨提出來，并命名為DIR1（Robson T. et al. A novelhuman stress response-related gene with a potential role in inducedradioresistance[J]. Radiat Res, 1999, 152, 451-461.）后來又因為它與FKBP蛋白家族的同源性被重新分類，并重新命名為FKBL類似蛋白，并且有研究發現他能夠參與新和成的P21蛋白（后來命名為Wisp39蛋白）的穩定合成。（Jascur T. et al. Regulation of p21(WAF1/CIP1) stability by WISp39, a Hsp90 binding TPR protein[J]. Mol Cell,2005, 17, 237-249.）FKBPL蛋白能夠與Hsp90、糖皮質激素受體以及肌動蛋白相互作用，從而起到一定的信號傳導作用，功能方面跟FKBPs家族蛋白很相似。（McKeen HD. et al. Anovel FK506-like binding protein interacts with the glucocorticoid receptorand regulates steroid receptor signaling[J]. Endocrinology, 2008, 149, 5724-5734.）有研究發現FKBPL蛋白能夠影響雌激素受體信號傳導，并且對乳腺癌藥物tamoxifen的反應有著決定性作用。（McKeen HD. et al. FKBPL regulates estrogen receptorsignaling and determines response to endocrine therapy[J]. Cancer Res, 2010,70, 1090-1100.）羅賓遜等人在1999年發現將L132或者UM-UC-3人膀胱癌細胞中的FKBPL敲除掉，會導致細胞周期的G2、G1和S期減緩，并通過促進DNA單鏈斷裂來增加細胞對x射線的抵抗能力。（Robson T. et al. A novel human stress response-related gene with apotential role in induced radioresistance[J]. Radiat Res, 1999, 152, 451-461.）Valentine等人在2011年發現全長的FKBPL的表達會抑制HMEC-1細胞的遷移，血小管以及體內外微血管的形成。（Valentine A. et al. FKBPL and peptide derivatives:novel biological agents that inhibit angiogenesis by a CD44-dependentmechanism[J]. Clin Cancer Res, 2011, 17, 1044-1056.）McKeen等人通過基因芯片技術發現FKBPL的高表達與乳腺癌患者存活率之間存在高度相關性，FKBPL的藥物研發也深入到癌癥I期的研究中。