[發(fā)明專利]一種紅麻轉(zhuǎn)基因創(chuàng)制細(xì)胞質(zhì)雄性不育系的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710061145.6
• 申請日: 2017-01-25
• 公開（公告）號: CN106916845B
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周瑞陽;周步進(jìn)
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西大學(xué)
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/00;A01H1/02
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種紅麻轉(zhuǎn)基因創(chuàng)制細(xì)胞質(zhì)雄性不育系的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、構(gòu)建可超量表達(dá)目標(biāo)基因的重組表達(dá)載體；目標(biāo)基因如SEQ ID No.1所示；

S2、將上述重組表達(dá)載體采用花粉管通道法導(dǎo)入紅麻中，收獲T₀代種子；

S3、播種上述T₀代種子獲得T₁代植株，在T₁代植株中篩選出花藥不開裂的轉(zhuǎn)基因雄性不育種質(zhì)HMS株；

S4、將上述轉(zhuǎn)基因雄性不育種質(zhì)與非轉(zhuǎn)基因的野生型雜交，獲得F1代植株；

S5、將表現(xiàn)可育的F₁代植株與穩(wěn)定表現(xiàn)雄性不育的HMS株測交，建立雄性不育株與可育株長期保持1:1分離的永久分離群體；

所述穩(wěn)定表現(xiàn)雄性不育的HMS株為S3中在海南和南寧種植均表現(xiàn)雄性不育的轉(zhuǎn)基因雄性不育株；

S6、以上述轉(zhuǎn)基因雄性不育種質(zhì)HMS株或S5所述永久分離群體中的雄性不育株為母本，與異源保持系雜交，并進(jìn)行核置換回交，即可獲得質(zhì)核異源細(xì)胞質(zhì)雄性不育系；

S7、以S6中質(zhì)核異源雄性不育系選育過程中任一世代的雄性不育株為母本，以非轉(zhuǎn)基因的野生型品種/系為父本，進(jìn)行核置換回交，即可選育出質(zhì)核同源細(xì)胞質(zhì)雄性不育系。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，S2中，將重組表達(dá)載體采用花粉管通道法導(dǎo)入紅麻保持系722B中。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述重組表達(dá)載體含有CaMV35S啟動子。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在回交的同時，與多個栽培品種測定配合力，每個世代選擇配合力高、性狀與父本相似，且花藥不開裂的雄性不育株繼續(xù)回交，同時父本套袋自交，回交不低于5～6代。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述異源保持系是除722B以外的保持系或品種。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，以S6選育的質(zhì)核異源細(xì)胞質(zhì)雄性不育系或S7選育的質(zhì)核同源細(xì)胞質(zhì)雄性不育系為母本，與新的同源或異源保持系雜交，并進(jìn)行核置換回交，又可轉(zhuǎn)育出新的質(zhì)核同源細(xì)胞質(zhì)雄性不育系或質(zhì)核異源細(xì)胞質(zhì)雄性不育系；如此循環(huán)往復(fù)，可不斷轉(zhuǎn)育出新的質(zhì)核同源和質(zhì)核異源細(xì)胞質(zhì)雄性不育系。