[發明專利]一株銅綠假單胞菌XCS007及其在防治煙草黑脛病中的應用

有效

• 申請號: 201710060673.X
• 申請日: 2017-01-25
• 公開（公告）號: CN107099467B
• 公開（公告）日: 2020-01-17
• 發明（設計）人: 陳德鑫;林北森;夏長劍;刁朝強;徐同偉;胡勇;楊藝煒;祖慶學;林松;吳永琴;李余江
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司海南省公司;貴州省煙草公司貴陽市公司;中國農業科學院煙草研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/385
• 代理公司: 11316 北京一格知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 李魏英

一株銅綠假單胞菌XCS007，分類名為Pseudomonas aeruginosa，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2016年4月5日，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No.12330。銅綠假單胞菌XCS007可高效產生幾丁質酶，最高活性達到12.25U/mL，對煙草黑脛病菌有優良的拮抗作用：菌液及菌液粗提物對煙草黑脛病菌菌絲抑制率達到91％以上。生防效果好：對接種煙草黑脛病菌的煙草植株，菌液及菌液粗提物的防治效果均能達到80％以上。用于生物防治對環境友好、不易產生抗藥性、對人畜安全，為煙草綠色防控發展創造條件。

技術領域

本發明屬于生物防治技術領域，具體涉及一株銅綠假單胞菌XCS007及其在防治煙草黑脛病中的應用。

背景技術

煙草黑脛病是一種重要的真菌性土傳病害，由寄生疫霉煙草致病變種(Phytophthora parasitica var.nicotianae)引起。煙草黑脛病可以侵染和危害煙草任何生長階段和現有栽培品種，平均發病率高達10％以上，常表現為黑脛、穿大褂、黑膏藥、碟片狀、爛腰等癥狀。防治煙草黑脛病通常采用抗病品種的選育、化學防治、生物防治、加強栽培管理等措施，但是化學農藥的濫用易誘發病原菌產生抗藥性，煙草抗病品種隨著使用年限的增加抗病性逐漸喪失等問題突出。生物防治具有對環境友好、不易產生抗藥性以及對人畜安全等優勢，可為煙草綠色防控發展創造條件，尤其是生防菌(拮抗菌)的篩選與應用作為其重要內容成為發展的必然趨勢，具有巨大的潛在應用和推廣價值。

研究表明，生防菌主要通過產生多種抗生代謝產物和酶類、競爭病原菌的營養和空間位點、誘導植物系統抗病性等多種方式來保護植物免受病原菌的危害。防治煙草黑脛病的生防菌廣泛存在于植物體內或土壤中，主要包括細菌(如芽胞桿菌屬、假單孢菌屬)、真菌(如木霉屬、青霉菌屬)和放線菌(如鏈霉菌屬)等，其中芽胞桿菌和假單胞菌研究和應用的較多。

幾丁質(Chitin)是多數病原真菌的細胞壁和昆蟲體壁的主要組成成分，但不存在于植物細胞壁中。在1905年，Benecke首次發現貝內克氏菌內的幾丁質酶能夠降解幾丁質后，對幾丁質酶的研究得到長足發展。現已有研究表明，幾丁質酶能在體外抑制木霉(Trichoderma viride)、指狀青霉(Penicillium digitatum)，炭疽菌(Colletitrochumlindemuthianum)、寄生隱從赤孢菌(Cryphonectria parasitica)、茄鏈格孢、TMV等的生長，可增強植物抗真菌病害的能力。另外，幾丁質酶的活性底物還有其它物質活性，包括溶菌酶活性、抑制昆蟲淀粉酶活性、核糖體失活蛋白的活性、肌動蛋白結合活性、脫乙酰殼多糖酶活性、參與催化轉糖基反應等。同時，幾丁質降解產物-幾丁寡糖在離體條件下對煙草黑脛病具有顯著防治效果，能顯著提高煙草體內的SOD、POD、PPO和幾丁質酶活性。

目前雖有生防菌的相關研究，但是其防治煙草黑脛病的效果較差，很少產生幾丁質酶，且即使產生幾丁質酶，其活性也較低。

發明內容

針對上述問題，本發明旨在提供一株高幾丁質酶活性的生防菌，能有效防治煙草的黑脛病。

一株銅綠假單胞菌XCS007，分類名為Pseudomonas aeruginosa，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2016年4月5日，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No.12330。

進一步地，銅綠假單胞菌XCS007的菌體呈棒狀，革蘭氏染色顯陰性。

進一步地，所述銅綠假單胞菌XCS007的培養基組份為：牛肉浸膏3.0g，蛋白胨5.0g，酵母粉1.0g，葡萄糖10.0g，瓊脂18.0g，蒸餾水1L。