[發(fā)明專利]TMD1蛋白用于治療骨質(zhì)流失疾病

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710057546.4
• 申請日: 2017-01-26
• 公開（公告）號(hào): CN107019796A
• 公開（公告）日: 2017-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄭琮霖;葉竹來;何美泠;施桂月;吳華林
• 申請（專利權(quán)）人: 高雄醫(yī)學(xué)大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K38/36
• 分類號(hào): A61K38/36;A61P19/08;A61P19/10;A61P19/02;A61P29/00
• 代理公司: 廣州市天河區(qū)倪律專利代理事務(wù)所(普通合伙)44348
• 代理人: 倪小敏

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是關(guān)于一種通過抑制核因子-κB配體的受體活化劑（receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL）誘發(fā)的蝕骨細(xì)胞分化，以治療骨質(zhì)流失疾病的方法。

背景技術(shù)

骨骼是在一種稱作改造的過程中不斷被重塑的一種活器官。在這個(gè)過程中，稱為蝕骨細(xì)胞的細(xì)胞再吸收骨組織，而稱為成骨細(xì)胞的細(xì)胞沉積新的骨組織。成骨細(xì)胞可以被封鎖在其所分泌的骨基質(zhì)內(nèi)，促其分化成骨細(xì)胞。這些細(xì)胞被認(rèn)為在感測骨負(fù)載中扮演重要的角色。在高負(fù)載條件下，成骨細(xì)胞增加骨質(zhì)量，而在低負(fù)載條件下，蝕骨細(xì)胞去除骨組織，優(yōu)化其結(jié)構(gòu)。因此，蝕骨細(xì)胞與骨質(zhì)流失或骨密度的降低有密切的關(guān)系。

人們可能因?yàn)樯硪蛩鼗蚱渌庠谝蛩囟琴|(zhì)流失或骨密度降低，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥。骨質(zhì)疏松癥的癥狀包括骨折、背痛、活動(dòng)能力受限（甚至無法移動(dòng)）。目前骨質(zhì)疏松癥的治療方法包括改善營養(yǎng)、運(yùn)動(dòng)、藥物治療等。關(guān)于藥物治療，臨床使用的藥物包括：雌激素或雌激素的同功異構(gòu)物、治療糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥的藥物、二磷酸鹽或降鈣素等。然而上述這些藥物全都有副作用，例如，二磷酸鹽會(huì)造成惡心、消化不良、腹瀉或便秘，而降鈣素會(huì)引起面部潮紅、頻尿、惡心或皮膚瘙癢。最重要的是，上述這些藥物不能抑制蝕骨細(xì)胞的產(chǎn)生，因此不能有效地治療骨質(zhì)疏松癥。

核因子-κB配體受體活化劑（receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL）是誘發(fā)衍生自骨髓的巨噬細(xì)胞（BMM）的蝕骨細(xì)胞分化的關(guān)鍵因素。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是治療與骨質(zhì)流失相關(guān)的疾病、病況或失調(diào)。在本發(fā)明中，通過抑制核因子-κB配體受體活化劑（RANKL）誘發(fā)的蝕骨細(xì)胞分化的受體活化劑，達(dá)到治療骨質(zhì)疏松癥的效果。在本發(fā)明中使用的血栓調(diào)節(jié)蛋白（TM）是天然存在的酶。血栓調(diào)節(jié)蛋白類凝集素結(jié)構(gòu)域（TM的第一結(jié)構(gòu)域，TMD1）可以配制成用于抑制RANKL的活化的蛋白質(zhì)藥物，從而通過抑制蝕骨細(xì)胞分化達(dá)成骨質(zhì)疏松癥的治療。

本發(fā)明在RAW264.7細(xì)胞中使用RANKL誘發(fā)蝕骨細(xì)胞分化的模型，第一次顯示TMD1的補(bǔ)充能以劑量依賴的方式顯著的緩解蝕骨細(xì)胞分化和骨質(zhì)再吸收。總而言之，如圖7所闡述的模型所示，本發(fā)明證明由單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞表達(dá)的TM，是蝕骨細(xì)胞生成的負(fù)調(diào)節(jié)劑，rTMD1的治療能抑制OVX誘發(fā)的骨質(zhì)流失。這些觀察結(jié)果，為骨質(zhì)流失的病癥提供了新的治療策略。因此，TMD1可能是骨質(zhì)流失疾病的新治療方法。

因此，本發(fā)明提供了一種在有需要的個(gè)體中治療骨質(zhì)流失疾病、病況或失調(diào)的方法，包含投予所述個(gè)體一醫(yī)藥上有效劑量的組合物，其包含血栓調(diào)節(jié)蛋白類凝集素結(jié)構(gòu)域（TMD1）。

在一實(shí)施例中，所述方法抑制個(gè)體體內(nèi)的蝕骨細(xì)胞分化。

在另一實(shí)施例中，所述方法抑制個(gè)體體內(nèi)核因子-κB配體受體活化劑(RANKL)的活化。

在一實(shí)施例中，所述骨質(zhì)流失疾病、病況或失調(diào)包括、但不限于骨質(zhì)疏松癥或風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

在一實(shí)施例中，所述個(gè)體是一個(gè)哺乳類動(dòng)物。在另一實(shí)施例中，所述個(gè)體是人類。

本發(fā)明另提供了一種組合物用于制備治療骨質(zhì)流失疾病、病況或失調(diào)的藥物的方法，其中所述組合物包含一醫(yī)藥上有效劑量的血栓調(diào)節(jié)蛋白類凝集素結(jié)構(gòu)域TMD1。

在一實(shí)施例中，所述組合物抑制蝕骨細(xì)胞分化。

在另一實(shí)施例中，所述組合物抑制核因子-κB配體受體活化劑RANKL的活化。

在一實(shí)施例中，所述骨質(zhì)流失疾病、病況或失調(diào)包含骨質(zhì)疏松癥或風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

在一實(shí)施例中，所述藥物是用于哺乳動(dòng)物。在另一實(shí)施例中，所述藥物是用于人類。

附圖說明

圖1顯示在RAW264.7-分化的蝕骨細(xì)胞中下調(diào)的TM表達(dá)。 (A)以M-CSF（20ng / ml）與RANKL（30ng / ml）處理4天的RAW 264.7細(xì)胞和分化的類蝕骨細(xì)胞中，使用IF染色偵測到的TM蛋白表達(dá)（原始放大倍數(shù)×200)。(B)經(jīng)M-CSF和RANKL處理的RAW 264.7細(xì)胞中，TM和CATK表達(dá)的免疫印跡分析。所示的代表性數(shù)據(jù)得自三個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。(C) 將(B)以定量表示。** P <0.01。