[發(fā)明專利]一種負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710057222.0
• 申請日: 2017-01-26
• 公開（公告）號: CN106729987A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王建華;張其清;孫曉敏;張志華;王營營
• 申請（專利權(quán)）人: 福州大學(xué)
• 主分類號: A61L27/24
• 分類號: A61L27/24;A61L27/20;A61L27/18;A61L27/54;A61L27/58;C08J3/24
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊,林文弘

1.一種負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架，其特征在于：以膠原溶液、殼聚糖溶液、透明質(zhì)酸鈉溶液和負(fù)載KGN小分子的PLGA微球?yàn)橹饕现频茫瞿z原溶液濃度為0.6wt%，殼聚糖溶液濃度為1wt%，透明質(zhì)酸鈉溶液濃度為1wt%；所述膠原溶液、殼聚糖溶液和透明質(zhì)酸鈉溶液的體積比為1~10:10:1~10。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架，其特征在于：所述復(fù)合支架中負(fù)載KGN小分子的PLGA微球的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.03wt%。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架，其特征在于：所述膠原來源于魚皮、豬皮、牛皮或牛腱。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架，其特征在于：所述負(fù)載KGN小分子的PLGA微球制備方法如下：

（A）準(zhǔn)確稱取200 mg PLGA溶于10 mL 二氯甲烷，超聲振蕩形成油相；

（B）再準(zhǔn)確稱量10mg KGN置于1 mL的超純水與甲醇的混合液中，在37℃下使其完全溶解形成內(nèi)水相；

（C）將步驟（B）所述內(nèi)水相緩慢注入步驟（A）所述油相中持續(xù)攪拌乳化10 min，使其均勻分散形成初乳乳劑；

（D）將步驟（C）所述初乳乳劑按60滴/min滴入含有5 mL 0.1wt%吐溫-20的50 mL 1wt% PVA溶液中形成外水相，持續(xù)攪拌形成復(fù)乳；

（E）將步驟（D）所述復(fù)乳充分離心，棄上清液，再經(jīng)超純水反復(fù)沖洗離心3次，冷凍干燥，在-20℃下避光保存。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架，其特征在于：步驟（B）中所述超純水與甲醇的混合液中，超純水與甲醇的體積比為1:1。

6.一種如權(quán)利要求1~5中任一項所述的負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

（1）分別將膠原、殼聚糖溶于0.1wt%的冰醋酸中制備成膠原溶液和殼聚糖溶液；

（2）將透明質(zhì)酸鈉溶于蒸餾水或去離子水制備成透明質(zhì)酸溶液；

（3）將步驟（1）所得膠原溶液與殼聚糖溶液混合，漩渦攪拌混合均勻；

（4）將步驟（2）所得透明質(zhì)酸鈉溶液緩慢加入步驟（3）的混合漩渦溶液中，混合均勻；

（5）將負(fù)載KGN小分子的PLGA微球加入步驟（4）所得混合溶液中，磁力攪拌過夜，冷凍干燥后添加交聯(lián)劑進(jìn)行交聯(lián)；

（6）交聯(lián)后用Na₂HPO₃、NaCl和蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，二次冷凍干燥后即得負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架制備方法，其特征在于：步驟（5）中所述交聯(lián)劑是由2-(N-嗎啉)乙磺酸一水合物、1-乙基-3（3-二甲基氨丙基）碳化二亞胺和N-羥基丁二酰亞胺溶于體積濃度為40%的乙醇溶液中制得，其中2-(N-嗎啉)乙磺酸一水合物、1-乙基-3（3-二甲基氨丙基）碳化二亞胺和N-羥基丁二酰亞胺的摩爾比為50:33:8。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種負(fù)載KGN的膠原/殼聚糖/透明質(zhì)酸鈉復(fù)合支架制備方法，其特征在于：步驟（6）中所述Na₂HPO₃和NaCl分別為0.1M Na₂HPO₃、1M NaCl和2M NaCl。