[發明專利]利用環氧樹脂保存海洋生物標本的新型方法

在審

• 申請號: 201710055862.8
• 申請日: 2017-01-20
• 公開（公告）號: CN107063810A
• 公開（公告）日: 2017-08-18
• 發明（設計）人: 王敏曉;程方平;何青
• 申請（專利權）人: 中國科學院海洋研究所
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物標本的制備方法領域，涉及海洋和淡水生物標本。

背景技術

目前，用來長期保存微型和小型水生生物是用福爾馬林溶液浸泡保存和利用天然樹脂封片保存。上述兩種方法雖然都能得到水生生物的標本，但其仍存在以下問題：首先，用福爾馬林溶液保存的小型水生生物有強烈的氣味，不適用于作為學生的教具。同時，浸泡的標本需要傾倒出來進行觀察，對于微小樣品來說操作過程麻煩，標本容易丟失，給教學和科研工作帶來不便。而如果運用經典的樹脂封片法，由于水生生物含水量高，直接用樹脂浸泡保存則樹脂難以滲透進細胞內部，因此經常需要甘油等粘稠液體將樣品懸浮于其中再進行天然樹脂封片，或者是先將樣品脫水后再利用天然樹脂封片。在使用天然樹脂封片保存時，標本制作步驟麻煩，樹脂固化時間極長，而且封片用的天然樹脂易于變黃老化從而使標本受到破壞。

因此，在生物科普教學方面，對于小型水生生物的科普教學常常缺位，或者開展困難。在高等教育水產及水生生物類課程教學中，作為教具的標本每次實驗后均有一定的損耗。在科研中，由于福爾馬林浸泡的標本無論是攜帶還是運輸都存在困難，從事分類和鑒定工作的人們很難進行有效交流。

為了解決上述技術問題，人們提出了各種各樣的改進方案，例如國家知識產權局就公開了一種生物標本的塑化方法{申請號：201010612850.9}包括如下步驟：a、生物標本固定：用的福爾馬林對生物標本進行完全固定；b、脫水、脫脂：固定好的生物標本經過制作后，丙酮置換直至標本的含水量＜1％為止；c、真空浸漬：將置換完全的生物標本浸漬于生物真空浸漬塑化劑中，在真空負壓冰柜中完成置換；d、烤箱烘烤：將置換完全生物標本放入烤箱中進行高溫烘烤，將生物標本體內多余的生物真空浸漬塑化劑去除干凈；e、硬化：將經過烤箱烘烤后的生物標本放入密閉的容器中硬化。

或是生物標本塑化法{申請號：00105847.9}法利用樹脂混合液將標本中的體液置換出來進行塑化，以提供一種生物標本塑化方法，其制作步驟包括有：脫水、完全浸泡于樹脂混合液中、靜置瀝干、涂布催化劑、靜置反應及干燥固化等步驟。經由塑化完成的生物標本，不但其外觀或標本組織細胞能保有完整狀態，且具有柔軟度及真實感，可供教學研究及標本的長期保存用。

亦或是透明水溶性樹脂小型生物標本制備法{申請號：200610054494.7}該方法使用原料為聚乙二醇、透明脲醛樹脂(液體)和冰醋酸。透明脲醛樹脂液與聚乙二醇重量比為1∶0.4～2.3，經聚合反應形成透明水溶性樹脂。冰醋酸(含量≥99.5)的加入量是聚乙二醇與透明脲醛樹脂進行聚合反應形成的透明總量的5～15％，主要起凝固劑的作用，用上述工藝制備的樹脂制作生物標本，主要步驟分為三步：A.底膠的制備、B.包埋生物標本、C.面膠的制備，該方法是一種簡單易行的方法，其優點在于：該方法原料易得，成本低；制備的透明水溶性樹脂流動性強，透明度好，便于生物標本的包埋；該方法制備的標本具韌性，不易開裂，能防蟲，防霉，并能保持標本原來的色彩，是一種成功率較高的小型生物標本的制作方法。

上述方法中，雖然在一定程度上解決了傳統標本制備方法中存在的技術問題，但是其途徑往往集中在改造樹脂，使之具備親水能力，從而保證可以迅速滲透到生物體內，或者仍然使用疏水樹脂，但需要復雜的前處理。此類途徑不僅操作復雜，且成本較高，使用壽命較低，且有的方法由于存在特殊操作步驟不適合使用在水生生物上，因此迫切的需要一種方便簡單、保存效果好的新方法來制備標本。

發明內容

本發明針對上述的在制備水生生物標本存在的操作復雜、缺乏廣泛適用性等技術問題，提出一種方法科學、操作方便、保存時間長且保存效果好、便于運輸的利用環氧樹脂保存生物標本的新型方法。

為了達到上述目的，本發明采用的技術方案為，本發明提供一種利用環氧樹脂保存水生生物標本的新型方法，包括以下有效步驟：

a、脫水：將已經用固定液處理過的水生生物放入無水乙醇或者丙酮中，進行脫水，待脫水完成后，將生物放置到容器中；

b、配置樹脂：將環氧樹脂和固化劑按照3∶1的比例配置均勻，得到環氧樹脂混合漿；

c、包埋：將混合好的環氧樹脂混合漿倒入容器中，對生物進行整姿，包埋；

d、固化：待包埋完成后采用自然固化法或烘干法對標本進行固化，待固化完成后即可得到生物標本。

作為優選，所述b步驟中，所述環氧樹脂為南亞128環氧樹脂(E-51)，所述固化劑為D230。

作為優選，所述d步驟中，所述烘干法的控制溫度在60℃～100℃。