[發(fā)明專利]一種尿液中腫瘤標志物5?羥吲哚乙酸的檢測試劑及其制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201710052134.1
• 申請日: 2017-01-24
• 公開（公告）號: CN107576656A
• 公開（公告）日: 2018-01-12
• 發(fā)明（設計）人: 劉東
• 申請（專利權）人: 劉東
• 主分類號: G01N21/82
• 分類號: G01N21/82;G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于生化檢測技術領域，具體為一種尿液中腫瘤標志物5-羥吲哚乙酸的檢測試劑及其制備方法。

背景技術

據(jù)2014年世界衛(wèi)生組織報告指出：中國新增癌癥病例居全球之首，新診斷癌癥例數(shù)為307萬，占全球總數(shù)的21.8％。癌癥死亡人數(shù)約220萬，占到全球癌癥死亡人數(shù)的26.9％。在所有疾病中癌癥的死亡率更是占據(jù)首位，是人類健康的第一殺手。

腫瘤的發(fā)展分為5個階段：良性、腫瘤細胞啟動期、腫瘤早期、腫瘤中期、晚期。實際上，在腫瘤發(fā)展的前4個階段早期發(fā)現(xiàn)、早期治療，都是可以完全治愈的，在前三個階段發(fā)現(xiàn)并治療，治愈率可達100％。而癌癥的可怕之處在于在前三個階段，尋常的臨床手段根本無法檢測出來，即便是到了中晚期，也只有非常專業(yè)的醫(yī)生通過較為先進的設備才能檢測出。最新的技術為采用化學方法，例如公開號為CN104390975A專利公開的技術方案，對尿液中腫瘤的標志物5-羥吲哚乙酸進行檢測，根據(jù)顯色即可判斷出是否患癌，但是，該技術存在反應速度慢的特點，尤其是在20℃以下需要水浴加熱或者延長反應時間，并且該專利公開的檢測化學物在尿液中5-羥吲哚乙酸濃度低時顯色并不明顯，所以，現(xiàn)有技術存在的缺陷為在腫瘤細胞前期，尿液中腫瘤標志物5-羥吲哚乙酸濃度低時不易檢測，溫度限制檢測反應速度慢，并不能真正實現(xiàn)廣譜性。

發(fā)明內容

為解決上述技術問題，本發(fā)明提供了一種尿液中腫瘤標志物5-羥吲哚乙酸的檢測試劑及其制備方法，實現(xiàn)的目的為增強檢測試劑的靈敏度，打破溫度對反應速度的限制，對5-羥吲哚乙酸有較高的特異性，即使在腫瘤前期5-羥吲哚乙酸濃度低時也能夠檢測到，廣譜性強。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開的技術方案為：本發(fā)明提供的一種尿液中腫瘤標志物5-羥吲哚乙酸的檢測試劑，組成該檢測試劑的成分包括硫酸汞、硝酸亞汞、硝酸鎳。選擇所述三種成份組成檢測試劑，能夠增強試劑的抗干擾性。

進一步的，本發(fā)明組成該檢測試劑的成分還包括1-亞硝基-2-萘酚。本試劑的1-亞硝基-2-萘酚可與5-羥吲哚乙酸偶聯(lián)呈紫色，顏色的深淺與尿液中5-羥吲哚乙酸含量呈正比，在5-羥吲哚乙酸極低的濃度(30mg/L左右)下人眼即可分辨出來；現(xiàn)有技術中的試劑一般都是根據(jù)亞汞離子與5-羥吲哚乙酸生成紅色來判定，當意識顏色變化時5-羥吲哚乙酸濃度已經為150mg/L以上，因此在5-羥吲哚乙酸150mg/L以下無法做出有效判定，所以，本發(fā)明的檢索試劑具有更強的靈敏度，廣譜性強。

優(yōu)選的，組成該檢測試劑的各成份在檢測試劑中的濃度分別為，硫酸汞0.15～0.39g/ml，硝酸亞汞0.05～0.31g/ml，硝酸鎳7.9～64mg/ml。

優(yōu)選的，1-亞硝基-2-萘酚在檢測試劑中的濃度為0.06～0.20g/ml。

本發(fā)明還公開了制備上述檢測試劑的方法，(1)A溶液的制備：稱取硫酸汞溶于硫酸溶液中獲得A溶液；

(2)B溶液的制備：稱取硝酸亞汞溶于硝酸溶液中獲得B溶液；

(3)C溶液的制備：稱取硝酸鎳溶于純化水中獲得C溶液；

(4)將步驟(1)～(3)制備得到的A、B、C溶液混合，即得所述尿液中腫瘤標志物5-羥吲哚乙酸檢測試劑。制備方法簡單，簡單混合即可得到檢測試劑，成本低廉、易于規(guī)模化生產。

優(yōu)選的，所述步驟(1)中硫酸溶液的濃度為3mol/L；所述步驟(2)中硝酸溶液的濃度為4mol/L。

優(yōu)選的，所述步驟(4)中A、B、C溶液按照的1∶1.1～1.8∶0.3～0.7體積比混合。在此體積比下試劑的顯色效果最好，成本低。

進一步的，當組成檢測試劑的成分還包括1-亞硝基-2-萘酚時，所述步驟(3)中還包括D溶液的制備：稱取1-亞硝基-2-萘酚溶于質量濃度為5％的乙酸溶液中獲得D溶液。

優(yōu)選的，所述步驟(4)中還包括將步驟(1)～(3)制備得到的A、B、C、D溶液按1∶1.1～1.8∶0.3～0.7∶1.1～1.5體積比混合，即得所述尿液中腫瘤標志物5-羥吲哚乙酸檢測試劑。

進一步的，所述步驟(1)中A溶液的濃度為0.15～0.39g/ml；所述步驟(2)B溶液的濃度為0.05～0.31g/ml；所述步驟(3)中C溶液的濃度為7.9～64mg/ml。

進一步的，所述步驟(3)中D溶液的濃度為0.06～0.20g/ml。