[發(fā)明專利]一種環(huán)狀RNA及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201710050392.6
• 申請日: 2017-01-23
• 公開（公告）號: CN106834290B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蔡木炎;賴炳權(quán);羅景燕;何重華;許少飛;李偉琴
• 申請（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院;廣州永諾生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/867;A61K31/7105;A61P35/00;A61K48/00
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 宋靜娜;郝傳鑫

本發(fā)明公開了一種環(huán)狀RNA及其用途，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，所述環(huán)狀RNA是由肝組織中SOX5基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄、剪切、環(huán)化而成的，所述環(huán)狀RNA可應(yīng)用于肝癌的診斷和治療。本發(fā)明對環(huán)狀RNA進(jìn)行深入研究，以便于診斷和治療肝癌。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種環(huán)狀RNA及其用途。

背景技術(shù)

原發(fā)性肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)簡稱肝癌，是全球范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一。全球每年約有74萬患者被新診斷為肝細(xì)胞癌，同時約有69萬患者死于肝癌。其中，我國占到了全球每年新發(fā)病例的55％，成為全世界肝癌最高發(fā)的地區(qū)之一。

環(huán)狀RNA(ciucular RNA，circRNA)是區(qū)別于傳統(tǒng)線性RNA的RNA家族新成員，不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴、并以共價鍵形成環(huán)形結(jié)構(gòu)的非編碼RNA分子。最新研究表明circRNA具有閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)，主要通過非典型可變剪切加工產(chǎn)生，廣泛存在于各種生物細(xì)胞中，具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，難以被RNA酶降解、表達(dá)豐度高、物種間保守性好，表達(dá)具有組織及時空特異性等特征，這些特點(diǎn)使得circRNA在肝癌診斷與治療方法的開發(fā)應(yīng)用上具有廣闊的前景。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)不足，而提供一種環(huán)狀RNA，且本發(fā)明還提供了該環(huán)狀RNA的用途。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：一種環(huán)狀RNA，所述環(huán)狀RNA的circbase ID為has_{_}circ_{_}0098181。

環(huán)狀RNA has_{_}circ_{_}0098181在基因組上的定位為：chr12：23998916-24048958，相應(yīng)的線性基因?yàn)镾OX5(NM_{_}152989)，環(huán)化的核苷酸序列有443個堿基。目前尚未有任何關(guān)于環(huán)狀RNA hsa_{_}circ_{_}0098181功能的報道。環(huán)狀RNA has_{_}circ_{_}0098181對應(yīng)的cDNA序列如SEQID NO:1所示，所述環(huán)狀RNA has_{_}circ_{_}0098181的序列如SEQ ID NO:2所示。所述環(huán)狀RNAhas_{_}circ_{_}0098181的結(jié)構(gòu)是由如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列首尾連接成的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。

另外，本發(fā)明還提供一種診斷肝癌的試劑盒，所述試劑盒包括檢測所述環(huán)狀RNA的表達(dá)量的試劑。本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)肝組織中SOX5基因的RNA存在環(huán)化現(xiàn)象，且環(huán)狀RNA has_{_}circ_{_}0098181在肝癌組織中表達(dá)顯著下調(diào)。

作為上述技術(shù)方案的改進(jìn)，所述試劑包括擴(kuò)增所述環(huán)狀RNA的引物。

作為上述技術(shù)方案進(jìn)一步地改進(jìn)，所述引物為由如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的DNA序列組成的引物對或由如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的DNA序列組成的引物對。

作為上述技術(shù)方案的改進(jìn)，所述試劑盒還包括肝組織RNA的提取試劑、cDNA的逆轉(zhuǎn)錄試劑。

另外，本發(fā)明還提供一種治療肝癌的藥物組合物，所述藥物組合物包括所述的環(huán)狀RNA和增加所述環(huán)狀RNA的表達(dá)量的試劑中的至少一種。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)的環(huán)狀RNAhas_{_}circ_{_}0098181引起細(xì)胞G1期阻滯，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞增殖，抑制遷移和侵襲。

另外，本發(fā)明還提供一種治療肝癌的表達(dá)載體，所述表達(dá)載體表達(dá)所述的環(huán)狀RNA。

另外，本發(fā)明還提供所述的環(huán)狀RNA在制備肝癌診斷試劑盒中的用途。