[發明專利]一株鼠抗豬PD-1單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 201710049240.4
• 申請日: 2017-01-20
• 公開（公告）號: CN107056944B
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 岳鋒;王選年;楊健;周娟娟;朱艷平;孫國鵬;李鵬;張艷芳
• 申請（專利權）人: 新鄉學院
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N5/20;G01N33/68;G01N33/577;A61K39/395;A61P37/06;A61P31/12
• 代理公司: 鄭州市華翔專利代理事務所(普通合伙) 41122
• 代理人: 張愛軍

本發明公開了一株鼠抗豬PD?1單克隆抗體，所述的單克隆抗體由保藏編號為CCTCC NO：C2016196的雜交瘤細胞株2B5分泌，所述的雜交瘤細胞株2B5保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址為中國武漢武漢大學，保藏日期為2016年11月30日。本發明的單抗為Ig G1類免疫球蛋白，且具有良好的效價。通過ELISA試驗鑒定，結果呈陽性反應，初步證明該株單抗是抗PD?1胞外區蛋白的，再用交叉試驗證明該株單抗與pET32a載體蛋白和無關蛋白無交叉反應，進一步證明所篩出的雜交瘤是特異的，用Western?blot鑒定陽性雜交瘤分泌單克隆抗體與重組蛋白發生特異性反應，最后用流式細胞術檢測證實雜交瘤分泌單克隆抗體可以與外周血單核細胞(PBMC)上PD?1蛋白有效結合。

技術領域

本發明涉及一株鼠抗豬PD-1單克隆抗體及其應用，屬于抗體工程技術領域。

背景技術

程序性死亡因子-1(Programmed Death-1，PD-1)屬于B7家族成員，它是50kDa～55kDa左右的I型跨膜蛋白分子，誘導性表達于活化的T細胞、B細胞、NK細胞、NKT細胞、單核細胞和樹突狀細胞。現已發現，PD-1有PD-L1和PD-L2兩個配體。PD-L1廣泛表達于T細胞、B細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、血管內皮細胞以及多種腫瘤細胞。PD-L2則誘導性表達于樹突狀細胞、巨噬細胞、髓源性肥大細胞和生發中心B細胞。PD-1/PD-L是一對重要的負性協同刺激分子，PD-1所介導的負性協同刺激信號能導致T細胞的凋亡和功能耗竭，在T細胞成熟過程的陰性和陽性選擇中發揮重要作用。近年來研究表明，PD-1/PD-L抑制途徑在自身免疫性疾病的發生發展以及慢性病毒感染中均發揮了重要作用。采用阻斷型抗體干預PD-1/PD-L信號可有效提高機體抗慢性病毒感染免疫力；相反，可通過增強PD-1負性信號來緩解自身免疫反應和抑制器官移植排斥反應。因此，制備鼠抗豬PD-1單克隆抗體具有重要的理論研究和實際應用價值。

發明內容

為了解決上述問題，本發明的目的是提供一株鼠抗豬PD-1單克隆抗體及其應用，該單克隆抗體能夠和豬PD-1蛋白特異性結合。

為了實現上述目的，本發明所采用的技術方案是：

一株鼠抗豬PD-1單克隆抗體，所述的單克隆抗體由保藏編號為CCTCC NO：C2016196的雜交瘤細胞株2B5分泌，所述的雜交瘤細胞株2B5保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址為中國武漢武漢大學，保藏日期為2016年11月30日。

所述的單克隆抗體為lgG1類免疫球蛋白。

一種所述的鼠抗豬PD-1單克隆抗體在制備檢測豬PD-1蛋白試劑中的應用。

所述的單克隆抗體在制備豬PD-1蛋白診斷試劑或輔助診斷試劑中的應用。

所述的診斷試劑包括免疫組織化學檢測試劑或血清免疫檢測試劑。

所述的血清免疫檢測試劑為酶聯免疫吸附檢測試劑。

一種包含所述的單克隆抗體的藥物組合物。

本發明的有益效果：